液相色谱

我在做液相测银杏中的槲皮素时，槲皮素的峰拖尾非常严重，并且槲皮素右边还有一个肩峰分不开。我的样品处理是1克药材加70%乙醇提取减压干燥后，加25%盐酸和甲醇水解(按药典方法水解)。50ml甲醇定容。

流动相为甲醇-水50：50，流速1.0; 甲醇-0.4%磷酸50：50，48：52 ; 甲醇-0.1%磷酸50：50，48：52; 甲醇-磷酸缓冲液(0.01mol/l磷酸-0.02mol/l磷酸二氢钾)50：50，48：52. 都是360nm。柱温为室温。谁能告诉我能使峰不拖尾和分开吗?非常感谢!!!还有样品处理时药典是水解后定容后进样，没有调PH，会不会损伤柱子? 0.4%磷酸PH我算了一下小于2，我的柱子是普通的会不会坏掉?谢谢

看看你的柱效吧，如果ph小于2的话，不要用太高温度，一般的柱子耐受到2，有的可以耐受到1

不知老兄这根柱子用了多长时间？

普通的柱子PH到2，对柱子的损伤很大，这有可能是你的样品脱尾的原因之一，现在有宽PH的柱子，建议更换柱子；

此外，看你的前处理，目标物受酸的影响很厉害，因此，流动相的PH值对峰形会有影响，所以要改善峰形，您需要筛选PH;

非常同意楼上的观点。

你那肯定是柱子有问题,让老板给你换个新柱子.

另外样品提取时25%盐酸要注意,69.4ml浓盐酸(36~38%)到100ml.

一定要把槲皮素提出来.

测定银杏叶片剂总银杏黄酮的含量，采用岛津LC-10A VP高效液相色谱仪;色谱柱为Hypersil ODS 柱(205mm×4.6mm,5μm);流动相：磷酸缓冲液(pH2)-四氢呋喃-甲醇-异丙醇(60：15：10：15);检测波长380nm.

反相高效液相色谱法测定了银杏叶中槲皮素、异鼠李素、山萘酚等6种黄酮成分的含量。采用HP1090型高效液相色谱仪;色谱柱为Zorbax ODS C18 柱(150mm×4mm，5μm);流动相：A.MeOH, B.四氢呋喃(THF)-H2O-HCOOH(34：65：1)，梯度洗脱;;检测波长350nm;柱温25℃。以单酚酸B(salvianolic acid

为内标。银杏叶用丙酮和盐酸混合溶液回流提取。

一般C18柱PH2~8，样品少量应该不会至坏

这个帖子很不错啊，学了好多东西