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标题:【求助】制备型HPLC的最大上样量

yizhi[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】制备型HPLC的最大上样量

要做一个制备型HPLC，但是不知道最大上样浓度和体积为多少.知道要根据柱子的体积来算，但是我问过技术人员（要到其他实验室做），他说最大上样体积为80微升，最大上样浓度为0.5微克/毫升,这是不是太少了呀。这样我分离1克/毫升得样品要做多少次呀！实在不明白。请教高手了！
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ladyhuahua[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这不好说
一要看你的设备和柱子的大小,
二要看你的样品是什么?
还要看你样品中的杂质情况
总之,要做实验!!!
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junhun[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那就慢慢加，一直到你的仪器分不开为止
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羊咩咩[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
对，只能做实验验证！
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yyaxw84[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
应该是自己根据实际情况，自行设计实验考察。
也可先查阅相关文献，再进行实验设计。
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zhy平平[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的柱子是250mm*10mm的半制备柱，泵流速最大可达到5ml/min，样品是正丁醇萃取物经大孔吸附树脂75%乙醇洗脱部分，想直接用液相分离，上样量最大能达多少?样品浓度配成100mg/ml时颜色是黑的，能直接上柱吗，会不会堵柱子啊。
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kswl870[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以根据分析色谱柱的结果，来决定制备色谱柱的上样量。实际上样量以相邻的杂质峰想接触为基准
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ALALA[使用道具]
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发表于 2014-9-17 15:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个要实验摸索的，先用分析柱把方法摸索好，分离度越大越好，这样才能保证大量上样的时候获得较好的分离度

10*250的柱子 通常一次分离 几十毫克差不多了（多肽样品）至于你的样品，性质不同，可能载量有差别，还是得实验……
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