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标题:[未解决]做银翘的连翘苷，两次检测样品出峰不同？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
xiaotaozi06[使用道具]
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发表于 2010-11-3 15:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

做银翘的连翘苷，两次检测样品出峰不同？

如题，最近在做银翘的连翘苷，液相色谱前两个月出峰时间在50分钟左右，但是最近做的时候设到60分钟都还没出峰，于是就调下比例，这次就出峰了，但是对照的峰却和样品的峰对不上了······差了有5分钟·····郁闷啊····求助一下到底有什么因素会造成这样？（机器是Waters2695，保证机器没有问题）
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小蹄子[使用道具]
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发表于 2010-11-3 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 xiaotaozi06 的帖子

在系统稳定后（即连续进对照品，知道其保留时间、峰面积重复性达标），进样品跟对照品保留时间不一致，只能说明这两个东西已经不是一个东西了，对照品是新配的吗？
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hewen0925[使用道具]
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发表于 2010-11-4 11:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是否是柱子的问题？
有时候没有平衡好也会有这样的现象
用液相做三聚氰胺的时候，开始几针出峰都会延迟
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iwfi325iwc[使用道具]
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发表于 2010-11-4 13:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
柱子多平衡一会试试，一般第一针都不好
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trymybestchy[使用道具]
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发表于 2010-11-4 13:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你用的是梯度还是等度？梯度的话看看比例阀有没有问题。有可能是流动相比例不准
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hplcangel[使用道具]
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发表于 2010-11-4 14:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
温度，色谱柱，流动相比例的差异都可能造成保留时间漂移，对照品与样品保留时间差那么多，我都怀疑那两个可能不是同一个物质了，把对照品加入到样品溶液中进一针看看出峰情况，检查一下样品前处理有没有问题。
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utek[使用道具]
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发表于 2010-11-4 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
恩，楼上说的很好。再问下楼主是用的手动进样还是自动进样，这里也可考虑下是否为进样原因。但是相差5-6分钟很是疑虑啊！
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luffygonww[使用道具]
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发表于 2010-11-5 13:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主的保留时间是一下子从50-60  还是慢慢变化的呢？ 对照品的保留时间也是从50-60吗？ 好奇怪啊
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xiaotaozi06[使用道具]
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发表于 2010-11-5 13:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
流动相是乙腈和水，用的是等度洗脱，自动进样的，今天换机器再做了一次，又可以了·····换了根柱子，我觉得和柱子没多大关系，因为这根柱子才用了4个月啊，我反而觉得和机器有关，昨天机器灯能量值低了，加上基线又不稳，一做含杂质多的样品就会出现类似情况，只不过这次有点离谱了··
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haohaorenjia[使用道具]
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发表于 2010-11-6 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
灯能量和保留时间没有关系哦。原因可能还是流动相的问题吧
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