【求助】关于浮游动物DNA条形码的实验

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标题:【求助】关于浮游动物DNA条形码的实验

zhy平平[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我现在在做关于浮游动物DNA条形码的实验,我就想让您们看看我pcr电泳后的照片，您看看能不能用来继续做凝胶回收DNA纯化的实验呢？

xuuuu[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从图看蛮好的效果啊，为什么怀疑不能做回收纯化呢？

zhy平平[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 xuuuu 于 2014-9-26 18:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

从图看蛮好的效果啊，为什么怀疑不能做回收纯化呢？

我做过一次，回收不了成功，据说回收纯化要损失部分DNA，所以我很想直接拿出去测序，可是别人又说直接拿去测序的话，pcr的产物需要一定的浓度要求啊。

caihong[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果要测序的话，建议扩增50微升的体系送测。因为浓度有些低，需要的体积要大些。另外，你的胶跑得并不理想，跑胶缓冲液和配胶要用1XTAE，而不是用水。

zhy平平[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 caihong 于 2014-9-26 18:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
如果要测序的话，建议扩增50微升的体系送测。因为浓度有些低，需要的体积要大些。另外，你的胶跑得并不理想，跑胶缓冲液和配胶要用1XTAE，而不是用水。
...

我的缓冲液和配胶也是用1XTAE的呢，唉，这已经是好一点的了，我用更小的浮游动物pcr产物跑出来的是这样的条带。我的pcr体系也是50微升。

hold住[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回收以后与T载体连接，将质粒送测序

yueban-1147[使用道具]
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发表于 2014-9-26 18:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼上正解，连T载只要很低的浓度就可以。

junjie05[使用道具]
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