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标题:[未解决]求助—phenomenex luna氨基柱分离碱基

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
zfzzz[使用道具]
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发表于 2010-11-12 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

求助—phenomenex luna氨基柱分离碱基

不知各位大虾们有没有做过分解后的DNA的HPLC的分离？求教适合这种柱子的A,T,C,G四种碱基标准品的溶解方法及标准曲线的制作。
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  • miracle   2010-11-12 16:38  可用分  +2   鼓励新手发起话题交流！欢迎常来！ ...
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发表于 2010-11-12 16:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 QQ

 小中大
A,T,C,G四种碱基标准品的理化性质楼主能不能描述一下？你准备用什么检测器和流动相？
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  • miracle   2010-11-12 19:19  可用分  +3   谢谢您的热心解答！
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发表于 2010-11-12 18:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

关于A,T,C,G四种碱基的性质

首先，碱基嘛，都带有碱性。分子量都是100多。除了G外都溶于水。检测器不知道用的是什么，只知道要如题牌子的氨基柱。这个柱子产品说明上是流动相用乙腈和水。可我文献上查到的都用的是甲醇。不知道选哪一个。还有可否直接用流动相来溶解标准品？
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  • miracle   2010-11-12 19:19  可用分  +2   积极回复交流！
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发表于 2010-11-14 16:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用甲醇溶解就可，因为检测波长实验设在254nm左右，所以流动相用甲醇乙腈均可以。
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ttkl533[使用道具]
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发表于 2010-11-14 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 QQ

 小中大

回复 #3 zfzzz 的帖子

楼主没有回答到点子上，知道样品的理化性质就知道能不能用流动相来溶解样品了，即样品能溶于流动相，且不会发生反应就行了，用甲醇还是乙腈，那就要看用的是什么检测器，是电化学还是紫外，如果是紫外那波长是多少，如果波长低，那就首选乙腈。
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发表于 2010-11-14 16:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
自身感觉 用乙腈好些。
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zfzzz[使用道具]
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发表于 2010-11-14 18:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢大家的回复。我查了查资料，应该是用紫外检测器。波长用乙腈的话是254nm。
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