小中大Originally posted by yhang at 2013-08-19 09:24:44
NADPH配制一般用你孵育体系所用的缓冲盐溶液(100mM的磷酸氢二钾缓冲液,磷酸调pH=7.40);
孵育体系要看你是做I相氧化还是水解
氧化反应的话需要NADPH的参与供氢,具体孵育体系包括:酶,底物,NADPH,磷酸盐培养 ...
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做I相和II相反应的实验方法你有吗?这个方案我都定了好久了,一直没找到,I相的看文献上是这样反应:底物+肝微粒+磷酸盐缓冲液+NADPH再生系统 (βNADP+,G-6-P,G-6-P脱氢酶和MgCl2)。II相反应是这样:底物+肝微粒+氯化镁+缓冲液+UDPGA ,但是市面上买的UDPGA都是没有活性的盐。