小中大【求助】生物样品的前处理-沉淀蛋白质
书上讲的和一篇文献里讲的有些矛盾，但是我又是初学者不敢确定自己理解得对不对，想和虫友们讨论一下。
生物样品进高效前都要经过前处理，在沉淀蛋白质时有一种方法是加入能与水混溶的有机溶剂。
一、书上讲到
“加入甲醇或乙腈后对血浆样品有一定的稀释作用，上清液中药物浓度会比原来低，且由于甲醇或乙腈的存在无法再用三氯甲烷、乙酸乙酯等有机溶剂萃取和浓集，甲醇-水（或乙腈-水）的混合液也很难挥干浓集，因此用甲醇或乙腈沉淀蛋白质直接进行测定的方法有时达不到反相HPLC测定灵敏度要求"。
二、但是我在一篇文献上又看到
'血浆样品为0.5 mL,加于聚丙烯离心管中;加入0·7 mL甲醇,手动振摇1 min; 3 500 r/min离心10 min;取上清液于另一离心管中,以0.5 mol/LNaOH调节pH至9;加入0.5 mL三氯甲烷,手动震摇10 min;然后以3 500 r/min离心10 min;取上清液,用0.5 mL三氯甲烷再提取一次后,小心弃去上清与氯仿层中间的变性蛋白层,合并二次的氯仿层, 40~50℃水浴挥干氯仿;在剩余残渣中加入500μL流动相,震荡使其溶解,过滤后上样。'
文献里用甲醇做变性剂后继续用三氯甲烷来提取 是不是有问题啊
