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标题:【求助】怎样测细胞随时间变化的图象？

dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】怎样测细胞随时间变化的图象？


求助各位高手：我想测量细胞在某一化合物加入后随时间变化，细胞形态的变化。因为用的是悬浮细胞，所以在加入化合物后，细胞在显微镜下是流动状态。我想测同一细胞不同时间的形态，和内部亮度的变化。有什么办法可以让细胞固定不动？我用的是荧光显微镜的油镜，放大一千倍。 谢谢！
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baidukk[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

能不能固定了以后再拍照呢
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

期待答案，楼主你用的是什么镜？zeiss的么？
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dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我不清楚的是：无论我固定后加化合物，还是加完化合物再固定，化合物能否进入细胞内了呢？请问大家有好的方法吗？请指点，谢谢！ 我用的是奥林巴斯荧光显微镜的油镜。
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hyuu[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

要想让细胞不动可采用微孔板培养，如果要特定观察一个细胞图像的时间变化，可在微孔板加入细胞时混合一些琼脂。还有就是使用恒温的微型培养系统在显微镜上连续观察拍照。观察某一化合物是否进入细胞，方法是将细胞放入混合化合物的培养基中一定时间，清洗后将细胞破碎测定细胞内化合物含量，可得到不同时间化合物进入细胞的速率及量。如果化合物可被标记就容易多了。
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dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢

非常感谢！ 请问用微孔板培养，是不是观察的时候就只能用倒置显微镜了？因为倒置的放大倍数小，所以我还是想用正置的。请帮忙详细想想办法，谢谢!
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any333[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问给细胞摄像有啥更方法？
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xiaoxiaoniao[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
使用高倍观察培养细胞可自制微孔板，方法如下：1 利用可拆酶标板条，去除底板后，将微孔掰下，据下（或打磨）孔底呈管状，然后将小管利用粘结剂粘在血盖片上，血盖片一定要处理洁净，粘牢后灭菌后备用。种植细胞后，可在倒置显微镜下高倍镜观察记录。2 使用处理好的血盖片，微量吸管吸取数个细胞（已处理待观察细胞，100%血清中）滴一滴在盖片上，呈半球状，倒置在24孔板上，板孔内有少量培养基以防止细胞干固，可正置观察。
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xiaoxiaoniao[使用道具]
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发表于 2014-11-1 17:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞摄像一般采用CCD摄像头连接在显微镜上，定时采集存储，比较前后变化。
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