细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】脂质体转染

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 32  1/4 1234››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】脂质体转染

zbboom[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114497
精华 0
积分 340
帖子 360
信誉分 100
可用分 2600
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
1

发表于 2014-11-3 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】脂质体转染

rt，脂质体转染
顶部
shenkunjie[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76942
精华 0
积分 712
帖子 1124
信誉分 100
可用分 6420
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
2

发表于 2014-11-3 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用的EGFP的质粒转染后12小时观察已经看见荧光,你指的空质粒是什么意思?具体是哪种GFP质粒啊?
顶部
bgf5[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76186
精华 1
积分 430
帖子 435
信誉分 102
可用分 3111
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
3

发表于 2014-11-3 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

共转染应该和DNA的纯度和浓度有很大关系吧？一般我们在做的时候，老板都要求260/280在1.7~1.9之间，偏近1.8，否则就要重做。 DNA在加入脂质体的时候应避免出现气泡。 在将混合液体加入培养细胞的时候应该是边加边摇，并尽快加入。 自己的经验，不知是否正确，仅供参考。
顶部
join[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72960
精华 0
积分 627
帖子 873
信誉分 100
可用分 5266
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
4

发表于 2014-11-3 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
什么细胞啊，有的细胞长的较慢，要过更长时间才能观察到绿色荧光
顶部
flower@@[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72873
精华 0
积分 374
帖子 427
信誉分 100
可用分 2966
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
5

发表于 2014-11-3 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般12小时后就能看到绿色荧光。 至于得到稳定的细胞，至少需要1个月哦，这是很顺利的情况
顶部
birdfish[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74196
精华 1
积分 539
帖子 654
信誉分 102
可用分 4196
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-8
状态 离线
6

发表于 2014-11-3 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1，是否细胞再长多一点再转比较好； 2，你用的是不是罗氏的fugene系列？fugene对容器材质要求很高，而且要求不得分 装，我有一同学把fugene分装后再转细胞就不行了。 3，抽的质粒跑过电泳吗？说实话，我对国产大抽试剂盒不甚放心。
顶部
ladyhuahua[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76658
精华 0
积分 984
帖子 1667
信誉分 100
可用分 9116
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-8
状态 离线
7

发表于 2014-11-3 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教一下，你的转染效率能有多大啊 估计一下吧，谢谢
顶部
dodoit[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114479
精华 1
积分 340
帖子 377
信誉分 101
可用分 2624
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
8

发表于 2014-11-3 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你转染的，是什么细胞系呢？
顶部
kuohao17[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77299
精华 0
积分 559
帖子 716
信誉分 101
可用分 4453
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-15
状态 离线
9

发表于 2014-11-3 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
老大，有没有筛过7721细胞啊？G418加多少才行？
顶部
she[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 72165
精华 0
积分 242
帖子 184
信誉分 100
可用分 1731
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-5
状态 离线
10

发表于 2014-11-3 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那你的细胞可真牛！我筛的7721加到800，转染组的细胞就只有几小群蹲在板子角落里，不死也不长，真急死我了，恨不得加10倍血清给它喂饱！怎办呢？
顶部
 32  1/4 1234››