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标题:【求助】Agilent液相色谱，203nm，水相加酸，基线波动

jude[使用道具]
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发表于 2014-11-21 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】Agilent液相色谱，203nm，水相加酸，基线波动

仪器：Agilent1200，203nm
样品：人参皂苷
流动相：乙腈-0.5%乙酸30-70
很奇怪的现象，甲醇时基线是平的，一换成流动相在线混合基线出现波浪形波动（20以内）
但是这个流动相在250nm下是平的，请教原因！
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abc816[使用道具]
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发表于 2014-11-21 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

和你的色谱条件有关
1%乙酸的截止吸收波长为230nm
所以，你用203，肯定会波动；你换磷酸试试
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niangao1980[使用道具]
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发表于 2014-11-21 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
貌似做 人身皂苷应该加0.5%磷酸比较好吧?
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jude[使用道具]
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发表于 2014-11-21 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我以为只要保持酸性条件，磷酸or醋酸无所谓，没想到还有这么大的差别啊！
那什么时候用磷酸？什么时候用醋酸呢？
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abc816[使用道具]
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发表于 2014-11-21 10:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
跟你的色谱条件有关系
主要是溶剂和检测波长
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baidukk[使用道具]
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发表于 2014-11-21 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
色谱条件选择的问题
要注意溶剂的戒指吸收波长和检测波长之间的临界点
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jude[使用道具]
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发表于 2014-11-21 10:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 abc816 于 2014-11-21 10:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

和你的色谱条件有关
1%乙酸的截止吸收波长为230nm
所以，你用203，肯定会波动；你换磷酸试试

不同浓度的乙酸截止吸收波长不同吗？请问这个230nm的出处在哪里？我没有找到
谢谢！
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lixi559[使用道具]
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发表于 2014-11-21 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
缓冲剂                   PKa                缓冲范围                         截止波长
三氟乙酸                》2                1.5-2.5                        210   （0.1%）
醋酸                     4.8                  3.8-5.8                         210   （10MM）
Tris HCL/tris          8.3                  7.3-9.3                         205   （10MM）
氯化铵                 9.2                   8.2-10.2                       200   （10MM）
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zhy平平[使用道具]
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发表于 2014-11-21 11:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有你确定一下你的水有没有问题，如果水质不好的话，在低波长处也会有很大吸收的。
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abc816[使用道具]
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 小中大


QUOTE:
原帖由 jude 于 2014-11-21 10:59 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

不同浓度的乙酸截止吸收波长不同吗？请问这个230nm的出处在哪里？我没有找到
谢谢！

我也是在资料上看到的
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