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标题:【求助】丙烯酰胺的检测方法 cation转移

uuooii[使用道具]
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【求助】丙烯酰胺的检测方法 cation转移

大家好,我是论坛的新手,请各位多多指教.
我现在正在寻找丙烯酰胺的检测方法,请各位帮帮忙,有劳各位了,
谢谢!
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greenbee[使用道具]
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回复 #1 uuooii 的帖子

请到CA (化学文摘)或AA(分析化学文摘)上检索一下丙烯酰胺的分析方法,你会大有斩获的。
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阿拉蕾[使用道具]
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中国卫生检验杂志2004年12月第14卷第6期Chinese Joumal of Health t,nMmtorv Technolocv 2004 691 【研究报告】 〔文章编号〕1004-8685(2004)06-691-03
高效液相色谱法测定淀粉类食品中丙烯酸胺研究‘
刘红河,陈春晓,柳其芳,何彩,刘小立 (深圳市疾病预防控制中心,广东518020)
摘 要
〔目的〕研究检测淀粉类食品中丙烯酞胺的高效液相色谱测定方法,用于实际样品测定。
〔方法〕用水提取 食品中丙烯酞胺,采用固相萃取小柱对样品液进行纯化,以二极管阵列高效液相色谱法测定其含量。
〔结果〕方法检出限 为lOng/g,回收率在80.0%一115.0%之间,精密度为5.34%(低浓度),3.40%(中等浓度)和4.30%(高浓度)。
〔结论〕该 方法测定食品中丙烯酞胺具有操作简单、干扰少、快速、准确可靠等特点,可以用于食品中丙烯酞胺测定的推广应用。
关键 词 丙烯酸胺;食品;高效液相色谱法;固相萃取技术
Detennination of acrylamide in atarch food by solid phase extraction and high performance liquid chromatography Liu Honghe,Chen Chunxiao,Liu Qcfang,et al.Shenzhen Centerfor Disease Control&Prevention,Shenzhen 518020, China. Ab stra ct (objective)T ost udya m ethodo fde terminationfo rac rylamidein s tarchfo odb ys olidp hasee xtraction一highp erformanceli quidc hromatography( SPE一HPLC).(Method)Th eac rylamidein fo odw asex tracted场water,an dp urified场solidp haseex - traction,th end etectedb yd iodea rrayd etectorof hi ghp erformanceli quidc hromatography.(R esults)T hed etectionli mitof th em ethod was lOng/g, the recoveries of 80.0%一1巧.0%,RSD of 5.34% (low concentration),3.40% (middle concentration) and 4.30% (highc oncentration)w ereo btained.(C onclusions)T hem ethodo fde terminationo fac rylamidein sta rchfo odb yS PE一HPLCw aslo w disturb,e asyto o perateda nda ccurate.It ca nb eu sedi nre searcho fth ea crylamidein fo od. Ke yw or ds Acrylamide;Food;拓沙pe南~ liquidc hromatogntphy;So lidp hasee xtraction 〔中图分类号)R155.5 〔文献标识码〕A 200 2年 4 月,瑞典斯德哥尔摩大学的MargaretaT orngvist教 授首次在油炸及焙烤的马铃薯和谷物类食品中发现了具有神 经毒性的潜在致癌物一丙烯酞胺(Acrylamide), 这是国际上首 次从食品中检出高含量的丙烯酞胺〔‘〕。这次在食品中检出足 以对人体健康产生危害的量,引起了包括世界卫生组织等国 际机构的重视。世界卫生组织在瑞士日内瓦召开关于丙烯酞 胺专家会议,专门商讨食物中丙烯酞胺问题的重要性。食品 中丙烯酞胺的产生机理,目前基本得到确认的是由食品中天 门冬酞胺和还原性糖在高温加热过程中通过美拉德反应 (Maillard reaction)而生成,食品加热到120℃以上即可发现丙烯 酞胺的生成,加工方式对丙烯酞胺的产生影响很大[2,3]。由于 丙烯酞胺已被WHO国际癌症研究中心(IRAC )列为可能致癌 物质[4l,动物实验和体外细胞实验都证明丙烯酞胺可导致遗 传物质的改变和癌症的发生[5l。因此该研究目前已引起包括 欧盟、FAO,W HO等ZF和国际组织的广泛关注。但这些研究 均处于刚起步阶段。在我国,到目前为止,仅见有关食品中丙 烯酞胺的新闻报道,具体的研究还是空白。食品中丙烯酞胺 的检验已列为我国“十五”国家重大科技专项“食品安全关键 技术”课题,卫生部食品安全计划也将食品中丙烯酞胺检测方 法的建立和我国食品丙烯酞胺分布调查作为一个重要部分。 目前,国际上食品中丙烯酞胺测定方法主要为气相色谱一质 谱联用法和高效液相色谱一质谱联用法两种方法,对仪器设 备要求较高。
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阿拉蕾[使用道具]
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本文在查阅文献[6-8」的基础上建立了食品中痕 量丙烯酞胺的高效液相色谱测定法,采用固相萃取法对样品 进行净化,该法简单、快速、灵敏、准确,适合批量检测。通过 对实际样品进行检验,取得了令人满意的效果。现报告如下: I 实验部分 1.1本岛津LC一10A高效液相色谱仪,配二极管阵列检测 器;离心沉淀机,0一5000r/min;0.45pun水系针筒式微孔滤膜过 滤器;Mili一Q Plus超纯水系统(美国密理博公司);丙烯酞胺标 准,纯度大于99% (美国Sigma公司)。丙烯酞胺储备液浓度为 1000mg/L甲醇溶液,存放于一20℃冰箱中,丙烯酞胺标准应用 液浓度为1.Om g/L的水溶液(临用新配);LC一C,8PK /54固相萃 取小柱(美国Supelco公司)。试剂除注明外均为分析纯。试验 用水为二次蒸馏超纯水。 1.2 色讲条件色谱柱:美国Aglient公司Aglient XDB反相 C,:柱,20cmx 4 .6m mi .d. ,5 pu n;流动相甲醇:水(体积比为5: 95),流速0.8m l/min;柱温4090;检测波长210nm;光谱扫描波 长190nm一370nm;进样体积5pda 1.3样品处理称取均质化食品样品约2.00g于20m1塑料 离心管中,加水至loml,旋涡振荡20min,40 00r/min离心20min, 取上清液(避开油层)5m1经0.45pun水系针筒式微孔滤膜过滤 器过滤后,取1.5ml滤液过事先用甲醇和水处理过的SPE小 柱,弃去最初0.5ml流出液,收集流出液进样测定。 2 结果与讨论 2.1仪器条件的选择比较了几种流动相,分别为甲醇、甲 醇:水(10:90)、甲醇:水(5:95)、甲醇:乙酸:水(0.5:0.1:99.4), 发现甲醇:水(5:95)条件下丙烯酞胺和样品中干扰物能达到较 , 广东省医学科研基金资助项目(项目编号.42004621) 万方数据 692 中国卫生检验杂志2004年12月第14卷第6期Chinese Journal of Health laboratory Technol 2004. December.V ol.14.N o.6 好的基线分离;在0.2ml/min- 2 .Om l/min范围内改变流动相流 速,发现在流速为0.6m l/min一1.20nil/min丙烯酞胺出峰时间 合适,峰形较好;对丙烯酞胺标准溶液用紫外光谱仪进行扫 描,其在210mn处有个最大吸收峰(图3);进样量大可提高测 定的灵敏度,但实验中发现,当进样量达到lopl以上时,峰形 将发生分散、拖尾等现象。综合考虑,我们确定测定的色谱条 件为:流动相为甲醇:水(5:95),流速0.80 ml/min,柱温4090,检 测波长210nm;进样量为511,测定结果令人满意。此条件下丙 烯酞胺的保留时间为4.95 min,标准及样品色谱图分别见图1 和图20 准曲线进行定量。固相萃取时采用真空泵抽滤时,我们发现 回收率相对常压下过滤有不同程度的下降,因此实际应用中 采用自然滤过,这样样品处理时间稍微延长,但测定结果较 好。 2.3 标准曲线的绘制将标准应用液分别配制为0.1,0.5,1. 0,2.0,5.0,7.0,10.0耐ml等不同浓度的丙烯酞胺标准溶液进 样分析,以质量浓度(4n,1)为横坐标,以峰面积为纵坐标绘制 标准曲线。线性方程y= 7 6647.74 x一6569.00,相关系数r为 0.9981,峰面积与质量浓度之间有良好的线性关系。 2.4 定性方法采用标准物质的保留时间和峰扫描光谱纯度 对照两种方式对样品峰进行准确定性。由于不少物质在 210nm波长处有吸收,只有同时满足两个条件的物质,我们才 认定为待测的丙烯酞胺。丙烯酞胺的扫描光谱图见图30 n朋 5 ︺阅日 日a 日二上3幼.m 图3 丙烯酞胺紫外扫描光谱图 图1 丙烯酞胺标准色谱图2.5 方法的回收率和精密度对六份样品分别采用高、中、低 三个浓度水平进行了丙烯酞胺的加标回收实验,结果见表to 从表中可看出,样品加标回收率在80.0%一115.0%之间,平均 加标回收率为97.3%,相对标准偏差为7.54%。取低浓度标 准溶液(0.104m1)、中等浓度标准溶液(5.04m1)和高浓度标 准溶液(10.0侧ntl)各1ml ,分别取七份,分别按样品处理方法 处理后进行测定,每个标准测定3次并取平均值计算精密度, 测得变异系数结果见表20 表 1 回 收 率 测 定 结 果 样品 编号加标量(A) 实测含量(P9) 回收率(%) 叨加加 ..呼月里口里 即翻们 口阅日 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 。3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 】 甘 .】 . 】 O CU 样品1 样品1 样品1 样品2 样品2 样品2 样品3 样品3 样品3 样品4 样品4 样品4 样品5 样品5 样品5 样品6 样品6 样品6 1.0 0 C 图 2 食 品 样 品 色 请 图 2.2 苹取条件确定比较了活性炭和C,。固相萃取小柱等几 种萃取吸附剂。发现活性炭吸附剂对强极性丙烯酞胺有很好 的保留特性,对样品中待测物有较大的浓缩作用,但由于其对 食品样品中所有成份均有吸附作用,因此对样品中共存的干 扰物质分离效果较差;固相萃取小柱对丙烯酞胺基本无吸附, 而对样品液中共存物质有较好的保留,可有效地除去样品液 中蛋白质等干扰物质,缺点是对样品液中待测物质无浓缩作 用。由于食品中共存物质对测定有一定的干扰,影响测定结 果的稳定性,且对色谱柱寿命影响较大,而本研究方法的灵敏 度基本上可达到不必浓缩即可对食品样品中丙烯酞胺进行测 定的要求,因此本研究采用G:固相萃取小柱对样品进行纯化 处理。我们对高中低三种不同浓度的丙烯酞胺标准溶液各七 份分别同时进行直接测定和过固相萃取柱后测定,发现两种 处理方法的测定结果之间无显著性差异,丙烯酞胺的回收率 在95%以上,因此实际测定时采用对标准溶液直接测定的标 1.0 1.0 5.0 7.0 1.0 0 0 1.0 0.88 4.62 6.39 1.04 4.88 6.94 1.02 4.79 6.66 0.50 4.50 6.77 1.08 4.87 6.70 1.15 5.03 6.78 88.0 92.4 91.3 104.0 97.6 99.1 102.0 95.8 95.1 80.0 96.0 96.7 108.0 97.4 95.7 115.0 100.6 96.9 0 0 1.0 5.0 7.0 万方数据 中国卫生检验杂志2004年12月第14卷第6期Chinese Journal of Health Iaboratorv Technol 2004. December.V ol.1 4.N o.6 693 表2 精密度测定结果《n=7) 标准浓度(阿rnl)峰面积均值峰面积标准差变异系数(%) 10.0 86 72 353767 782761 5.34 3.40 4.30 l0 0 2.6 方法检测限进空白样,以基线3倍噪声值在标准曲线 查得结果计算,测得方法检出限为O.Olng,定量下限为O.Olng, 按测定方法取样品量2g计算,本方法最低检出量为0.01解9 (即lOng/g)o 2.7 干扰试验食品中常见成份淀粉、蔗糖、蛋白质、金属、非 金属等共存物,在前处理阶段多已除去,因而对测定不会造成 干扰;由于丙烯酞胺在酸性条件下易发生水解反应,导致测定 结果偏低,因此pH值对测定结果有一定影响,中性条件下测 定结果稳定。食品样品pH多在近中性范围,测定实际样品时 可不考虑样品声值的影响,对于加工过程中加有食醋等pH 值较低的食物,处理前可用NaOH等溶液调节至近中性,不影 响测定;含油较多的食品样品,在提取前用正己烷预先提取一 次以除去大部分油脂,可防止油脂的干扰。 3 结论 我 国“ 十 五”国家重大科技专项“食品安全关键技术”课题 中有关建立食品中丙烯酞胺测定方法要求:检测低限小于 lOng/g、回收率大于70%、相对标准偏差小于20%。本次所建 立的食品中痕量丙烯酞胺的高效液相色谱分析方法操作简 便、重现性好,而且方法精密度及检测限均符合痕量分析的要 求,也满足了我国“十五”国家重大科技专项“食品安全关键技 术”课题要求。
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参 考 文 献 [1] B eteH .Ch emical&EngineeringN ews.20 02,80(19):33. [2]M ottramD S ,et al .Ac rylamideis fo rmedin th eM ailardr eaction[J ].Natur e,2 00 2,419:448. [3]St adlerR H ,et al .A crylamidefro mM ailardre actionp roducts[J I.N ature, 20 02 ,4 19:449 仁4]IA RC.Mo nographson th eev aluationof ca rcinogenri skto hu mans:so mein - dus tri alc h emicals.N o.60 .Ly on:in ternationala gencyf orr esearcho nc ancer ,1 9 9 4.389一433. 仁5] W TO.Gu idelinesfo rd rinkingw aterq uality[M I.Second.Ce neva,19 93. (1) :7 3. [6]F DAC entersfo rd iseasec ontrolan dp revention.Ex ploratory datao na crylami de in fo ods一February2 003u pdate[EB /0L].cuturl('http://www.ofs') an.fda . gov /一 山 ns. [7] T akatsukiS ,Ne motoS ,Sa sakiK ,et al .De terminationo fac rylamidein p roces sed fo o ds场LC/MSu singc olumns witching[JI . ShokuhinE iseigaku Zas sh i.2 003,44(2):8 9一95. [8)Sh arpD .Acrylamidein fo od[J].L ancet,2003,361:361. (收 稿 日 期 :20 04- 07 -04 ) 【研究报告】 〔文章编号〕1004-8685(2004)06-693-03 沉淀缓冲增菌法提高水中ElTo :霍乱弧菌阳性检出率的研究和应用‘ 陈德云,张慧红,胡伟宁,陈国雄,符发雄,巫结冰,老倩群 (佛山市顺德区疾病预防控制中心,广东528300) 摘 要 〔目的〕应用化学沉淀剂将ElT or霍乱弧菌沉淀聚集于水体下层,在缓冲溶液作用下保持特定的生长环境, 从而起到抑制其它肠杆菌的生长,避免和减少检测中易出现假阴性的误差,以达到提高霍乱弧菌的阳性检出率。为疫情 监测和调查提供准确可靠的科学依据。〔方法〕以碳酸钠为介质,硫酸亚铁为沉淀剂,在一定比例用量下,沉淀剂将水中 霍乱弧菌沉淀聚集于水体下层,弃去上层清液沉淀中加入碳酸盐缓冲溶液。用等量双倍浓碱蛋白陈进行增菌、分离、鉴 定。(结果〕沉淀剂可将水中97.67%一99.85% El Tor霍乱弧菌沉淀至水体下层,缓冲溶液在增菌过程中声变异数 1.19%,处于不变的良好状态。在此条件下El Tor霍乱弧菌最小检量0.014 - 0.140cfu/ml,比常规增菌法阳性检出提高一 个对数;沉淀缓冲增菌法比常规增菌法阳性检出率提高2.6倍。检测中无需二次增菌,比常规增菌法缩短一半的工作周 期,同时可降低节约70%的试剂成本。〔结论〕本检验方法具有操作简便,精确度高,最小检出量大,阳性检出率高,工作 周期短,试剂成本低的特点,适用于霍乱传染病的预防控制和调查。 关键词霍乱弧菌;沉淀缓冲;阳性检出率 Study and application of precipitation bufering proliferation method to enhance positive rate of El Tor vibrio cholerae in water ChenD eyun,ZhangH uihong,Hu W eining,et al .ShundeC enterfo rD iseaseC ontrolan d an was used to precipitate El Tor Vihrio Prevention, Guangdong 528300, China. (Objective) Chemical p cholerae to the s}ilgtrate of water.玩bufer sogrowth conditions were maintained, to restrain positive rate of El Tor Vibrio cholerae the growth enhanced. of other Escherichia Colt and reduce determination error of false Accurate scientific basis was provided for monitoring and survey Methods) In sodium carbonate medium, ferrous sulfate of certain ratioquantity precipitated and accumulated El Tor Vibno With lucid water taken away, carbonate was added to as bufer solution. After then, alkaline peptone of concentrationw asa ddedw itht hes amec ubageto p roliferate,separatea ndid entifyE lTo rVi bnoc holerae.(Re sults)P recipitator , 基金项目:广东省佛山市卫生局医学科研立项,佛卫(2004)226号(项目编号:2004472) 万方数据
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以上提供一种方法仅做参考,我也没做过。
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