【求助】 PCR退火温度计算

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标题:【求助】 PCR退火温度计算

33号[使用道具]
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发表于 2014-11-29 17:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

特向大家请教pcr退火温度计算，谢谢

junhun[使用道具]
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发表于 2014-11-29 17:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

总的说来，决定引物退火温度（Tm值）最重要的因素就是引物的长度。有以下公式可以用于粗略计算引物的退火温度。
在引物长度小于20bp时：[4(G+C)+2(A+T)]-5℃
在引物长度大于20bp时：62.3℃+0.41℃(%G-C)-500/length-5℃

另外有许多软件也可以对退火温度进行计算，其计算原理会各有不同，因此有时计算出的数值可能会有少量差距。

mingming0638[使用道具]
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发表于 2014-11-29 17:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

引物Tm是指解链温度，Tann是退火温度或复性温度，二者不能等同

ha111[使用道具]
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发表于 2014-11-29 17:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

一个引物有两个起始端，怎么办？平均？