【求助】关于柱层析收集液结晶的一些疑惑，望不吝赐教

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标题:【求助】关于柱层析收集液结晶的一些疑惑，望不吝赐教

gmjghh[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

楼主在做洋葱中小极性分子的提取，没有目标产物，只要分得的化合物纯度高，量≥10mg就ok→▁→
前处理过后是乙醇加热浸提浓缩再然后过大孔树脂粗分了几段，现在在过硅胶柱，遇到了一些困难，那么问题来了...
①样品1g以上我会过柱，100mg左右我就跑制备板了，那么硅胶柱最小的上样量大概是多大呢？我这边最小的柱子直径是1cm左右
②有些收集液放置一晚或者更长时间，挥发掉部分溶剂后析出晶体，听师兄说只要将其过滤，拿多种溶剂冲洗就能得到纯的化合物了，结晶是因为溶剂挥发溶液过饱和，那怎么知道它析出的是单一化合物还是混合物呢？
③俩瓶相邻组分析出的晶体有没有可能是俩种不同的化合物？
④具体拿什么溶剂洗，有没有什么原则可以参考？

光靠签到，金币有限，第一次发帖，希望能得到大家的帮助

feima+[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

①样品1g以上我会过柱，100mg左右我就跑制备板了，那么硅胶柱最小的上样量大概是多大呢？我这边最小的柱子直径是1cm左右
②有些收集液放置一晚或者更长时间，挥发掉部分溶剂后析出晶体，听师兄说只要将其过滤，拿多种溶剂冲洗就能得到纯的化合物了，结晶是因为溶剂挥发溶液过饱和，那怎么知道它析出的是单一化合物还是混合物呢？
③俩瓶相邻组分析出的晶体有没有可能是俩种不同的化合物？
④具体拿什么溶剂洗，有没有什么原则可以参考？
柱子直径是1cm,可以分离30mg的样品，我分过20mg的，
是单一化合物还是混合物，爬个板就OK,
俩瓶相邻组分析出的晶体有可能是俩种不同的化合物，也有可能是同一化合物
具体拿什么溶剂洗要根据化合物的性质，就是用对样品溶解小对杂质溶解大的溶剂

gmjghh[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢，那请问为什么要用抽洗呢？另外固体很难溶解啊，做核磁都直接拿DMSO溶的，可TLC不能用DMSO溶啊.

zwsyrt[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 gmjghh 于 2014-12-2 15:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
谢谢，那请问为什么要用抽洗呢？另外固体很难溶解啊，做核磁都直接拿DMSO溶的，可TLC不能用DMSO溶啊.

杂质也很难溶解吗？抽洗可以很快去除杂质的。

gmjghh[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 feima+ 于 2014-12-2 15:15 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
①样品1g以上我会过柱，100mg左右我就跑制备板了，那么硅胶柱最小的上样量大概是多大呢？我这边最小的柱子直径是1cm左右
②有些收集液放置一晚或者更长时间，挥发掉部分溶剂后析出晶体，听师兄说只要将其过滤，拿多种溶剂冲洗就 ...

谢谢你~
①20mg样品过柱子也是干法装柱干法上样吗？如果是干法上样，那得用多少硅胶拌样呢？不会也用20mg吧？
②结晶出来的东西一般都难溶或者微溶，如果要点板那要用大量溶剂去溶解咯？
④某种溶剂对样品的溶解度大小我们也只能从洗的过程中去观察吧？

bgf5[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1.拌样用硅胶要根据具体化合物的溶解性
2.不爬板也可以，有条件直接打谱
4.如是未知物只能从洗的过程中去观察

gmjghh[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 bgf5 于 2014-12-2 15:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
1.拌样用硅胶要根据具体化合物的溶解性
2.不爬板也可以，有条件直接打谱
4.如是未知物只能从洗的过程中去观察

谢谢
①溶解性好的话拌样硅胶可以少加些？请问你过20mg样品那次是什么情况呢？

dragonkilly[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

2楼回答的不错，我想补充的是，洗固体我这用的是抽洗。结晶的固体先不管是不是纯的，关键是固体，应该比液体纯吧。分离每个步骤只要能使样品得到富集，这步就不白做。先拿出来在说。然后用抽洗（不知道你看懂这个概念不洗液瞬间接触样品的表面，然后被抽走），固体用TLC 、hplc 看看纯度。决定下部怎么做。

redbutterfly[使用道具]
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发表于 2014-12-2 15:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 gmjghh 于 2014-12-2 15:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

谢谢你~
①20mg样品过柱子也是干法装柱干法上样吗？如果是干法上样，那得用多少硅胶拌样呢？不会也用20mg吧？
②结晶出来的东西一般都难溶或者微溶，如果要点板那要用大量溶剂去溶解咯？
④某种溶剂对样品的溶解度大小我们也只 ...

20mg 里面是不是含有色素等物质，上个凝胶柱吧。去点色素。硅胶有死吸附的。

gmjghh[使用道具]
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原帖由 dragonkilly 于 2014-12-2 15:17 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
2楼回答的不错，我想补充的是，洗固体我这用的是抽洗。结晶的固体先不管是不是纯的，关键是固体，应该比液体纯吧。分离每个步骤只要能使样品得到富集，这步就不白做。先拿出来在说。然后用抽洗（不知道你看懂这个概念不洗液瞬间 ...

谢谢，那请问为什么要用抽洗呢？另外固体很难溶解啊，做核磁都直接拿DMSO溶的，可TLC不能用DMSO溶啊

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