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标题:【求助】色谱峰总有前延,峰形不正

8princess8[使用道具]
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【求助】色谱峰总有前延,峰形不正

今天做HPLC,样品峰形不正太,起初以为是杂质,用梯度分离,不好使;后来再进一针标准品,发现标准品的峰形依然不好。开始排查原因:
1. 起初流动相加了0.8%冰醋酸, 考虑是否是酸性不够,改为0.8%甲酸,峰形依然没有改变;
2. 考虑是否柱效不行,换了一根柱子;冒险把柱子反冲一次,峰形依然没有改变;
3. 进样阀用甲醇清洗,作用不大;
4. 进针色谱甲醇,用甲醇溶解的样品,看了下吸收度,认为基线基本没有变化;
5. 流动相把甲醇换成乙腈,峰形还是没有变化;
6. 把0.8%冰醋酸流动相,换成纯水峰形还是没有变化;
另外,这根柱子、色谱条件和液相一个月前测这个样品峰形还非常好,最近搬了一次校区再用就不好了,非常奇怪。
明天,把这根柱子换到另一台液相上再试试,再认真清理下进样阀,看看结果吧,实验太揪心!!!
跟大家请教下还有什么方面没有注意到,需要处理下???


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2014-12-2 16:09
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8princess8[使用道具]
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色谱甲醇进样色谱峰


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fangxiang[使用道具]
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1. 从老校区灌水过来
2. 调整进样速度?
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原帖由 fangxiang 于 2014-12-2 16:11 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
1. 从老校区灌水过来
2. 调整进样速度?

如何调整进样速度?
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orangecake[使用道具]
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原帖由 8princess8 于 2014-12-2 16:12 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

如何调整进样速度?

柱子稍倾斜一点
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TNT[使用道具]
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流通池有没有污染?样品用流动相溶解。
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yueban-1147[使用道具]
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1.对照品是否不醇,后面怎么还会有个小峰,建议重新配对照品,或者试试把对照品的峰往后拉,看一下能不能跟前面的东西分开
2.色谱柱在搬运过程是否有碰撞,导致色谱柱损坏,影响分析效果
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8princess8[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 yueban-1147 于 2014-12-2 16:13 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
1.对照品是否不醇,后面怎么还会有个小峰,建议重新配对照品,或者试试把对照品的峰往后拉,看一下能不能跟前面的东西分开
2.色谱柱在搬运过程是否有碰撞,导致色谱柱损坏,影响分析效果 ...

在别的液相上,用这个柱子没有问题,考虑是进样阀的问题,再重要冲洗下管路
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junhun[使用道具]
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建议试一针不加任何样品的纯甲醇
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8princess8[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 junhun 于 2014-12-2 16:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
建议试一针不加任何样品的纯甲醇

试了,第二个图就是,看吸收度非常小,基线基本没变化
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