小中大操作是导致污染的最主要原因
根据本人的经验,操作是导致细菌污染的最主要原因。 本人以前曾经在一个相当严格的实验室工作过,那里的细胞室的要求是按照外科手术室要求的,更衣,换鞋,洗手,酒精擦手,戴口罩、帽子,所有培养液中加双抗,所有细胞操作器械专用;每天紫外灯照射40分钟后才允许进入。但是,就是这样的条件,操作不好,一样要污染。 现在本人工作的实验室要求比那个实验室差的天远地远,但是只要操作仔细了,一样可以把最难养的细胞养好。本人曾经参观过一些名人进行细胞操作,也就是换上拖鞋,连工作服都不换就进细胞室,细胞一样没有问题。所以,最主要的是:工作服,尤其是袖口,消毒情况如何,袖口是否能够扎紧。如果不能保证,不如索性把袖口挽起来,把手臂用酒精擦一遍(其实我本人连擦都懒得擦,一样没事)。操作时,滴管两头都要烧。还有一点很重要,就是滴管头在加液体的时候,不要深入瓶口太多。在倒培养液的时候,可以拿起培养瓶直接倒,但是注意要倒干净,瓶口沾的最后一滴液体千万不可回流倒瓶内。 还有一些基本的问题,比如瓶口要多烧一会,怀疑滴管有污染就一定要换。一旦细胞出现污染的迹象了,就一定要扔掉。如果实在想挽救,可以用一些高档抗生素(医院里给病人加药后的药瓶,用无菌盐水涮涮就能用,浓度足够),但要小心浓度太高细胞也会死亡。