【求助】分离小鼠静息状态的巨噬细胞的方法

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标题:【求助】分离小鼠静息状态的巨噬细胞的方法

hustwb[使用道具]
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发表于 2014-12-6 08:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

大家好，我想分离小鼠静息状态的巨噬细胞，我看有些人用什么肉汤之类的，还有就是直接洗腹腔的，从方法和配方等来说感觉有点乱，不知具体操作方法是怎么样的，还望高人指点！谢谢

seagate[使用道具]
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发表于 2014-12-6 08:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

不清楚你的静息状态指什么。分离巨噬细胞分为两种：一种刺激后分离（比如，腹腔注射巯基乙酸肉汤、LPS等），这种方式是在原来就有的巨噬细胞的基础上，把血液里面的巨噬细胞通过刺激也招引过来了，不能完全代表固有巨噬细胞；另一种就是你说的静息状态了（这个表述好像不太合适），这是原本腹腔或者肺泡里就有的，不需要刺激，直接分离就好了。网上有很多方法，你可以自己查一下，很容易的。我做过刺激的，不过最终我用收集到的细胞去检测结果有点乱，可能是操作以及小鼠饲养的差异吧。方法还是很容易的。

hustwb[使用道具]
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发表于 2014-12-6 08:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

嗯，我说的就是后一种，由于不能用LPS等进行刺激，而巨噬细胞又是不增殖的细胞，所以我必须直接分离，尝试了下，但数量很少啊，看着细胞也貌似不对，请问你分离后用胰酶消化的吗，据说消化不下来呢？

flower@@[使用道具]
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发表于 2014-12-6 08:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我是分离细胞抽提的RNA，我分离细胞以后，会贴壁两个小时，然后用Trizol直接从板子上裂解下来了。