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标题:【求助】PCR扩增产物 聚丙烯酰胺凝胶电泳

hot_hot_hot[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PCR扩增产物 聚丙烯酰胺凝胶电泳


在下是个 菜鸟，做pcr用的是Mix，1微升模板，0.8微升引物，10微升体系，点样5微升，为什么这么不清楚，哪位大哥知道
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baidukk[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

聚丙烯酰胺一般用来跑蛋白电泳，DNA电泳一般都用琼脂糖。
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moonlight45[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

聚丙烯酰胺也能跑DNA，我跑过，效果挺好的，你的PCR产物纯化了吗？
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小游abc[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 moonlight45 于 2015-1-13 16:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

聚丙烯酰胺也能跑DNA，我跑过，效果挺好的，你的PCR产物纯化了吗？

怎么纯化pcr产物啊？请教请教 我很无知
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

氯仿抽提，乙醇沉淀，你试试
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dragonkilly[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们一般是先用自己配的试剂提取，再用QIAGEN的试剂盒纯化，跑出来的胶效果很不错
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sunshine039[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

到网上搜ctab法提取DNA上面有纯化的方法。
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
怎么纯化pcr产物啊？请教请教 我很无知

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请问你做的是什么，为什么用PAGE和银染？是SSR还是其他的分子标记？？
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gemei0115[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
最好在重复一下，这原因不好找。染色和显影都用新的，注意显影的时间。个人认为不用纯化
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gemei0115[使用道具]
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发表于 2015-1-13 16:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问你做的是什么，为什么用PAGE和银染？是SSR还是其他的分子标记？？？

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我做的是 DGGE,变性凝胶电泳。
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