小中大【求助】请各位高手帮我看看这究竟是什么原因?
由于本人第一次做分子,如有描述语言不正确请各位多多包涵,我提取的是植物根中AM真菌的DNA,目的是用来鉴定此植物根内的AM真菌是哪一类。用的maker是上海生工买的总共六条带(2000,1000,750,500,250,100),核酸染料是4s green
我想请教的问题是:
1为什么我的pcr产物跑电泳以后在凝胶成像系统下,点样孔一直到终点呈现一条带状的荧光带,第一次PCR后是没有的,第二次就有一些样就会这样了,第三次PCR就更严重了(图片中的左边的那块胶是第三次PCR的结果,右边的是第二次PCR的结果)。
2. 为什么我的maker总是很模糊,样品和maker都是用同样的核酸染料4s green,每次样品带都比maker的带亮且清晰
3.我之前做了DNA的样品去蛋白,不去蛋白的时候pcr以后是有目的条带的,但是去了以后目的条带就没有了。
请各位高手为我指点一下,O(∩_∩)O谢谢!