缓冲盐的浓度多少才能避免析出而又不影响分析。

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标题:[已解决]缓冲盐的浓度多少才能避免析出而又不影响分析。

[已解决]本主题悬赏可用分 10

kuailedeadai[使用道具]
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发表于 2010-12-20 15:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

前几天在论坛上向大家求助过，就是流动相用缓冲盐的时候，因为缓冲盐析出使得实验无法进行。超声清洗后才得以继续。老师说我的缓冲盐浓度是40mM，浓度太高了，5-6mM会比较合适。我看大部分的文献上缓冲盐的浓度和我用的差不多，可是我的为什么会非常容易的析出堵住单向阀呢。是以为浓度太高了还是其它的原因呢？大家帮我分析一下吧！老是有问题我修机器都快崩溃了呵呵

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miracle 2010-12-20 16:37 可用分 +2 感谢朋友对论坛的支持！

maicaixiaogu[使用道具]
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2最佳答案

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小中大

QUOTE:

原帖由 kuailedeadai 于 2010-12-20 15:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
前几天在论坛上向大家求助过，就是流动相用缓冲盐的时候，因为缓冲盐析出使得实验无法进行。超声清洗后才得以继续。老师说我的缓冲盐浓度是40mM，浓度太高了，5-6mM会比较合适。我看大部分的文献上缓冲盐的浓度和我用的差不 ...

40mM是高了，若能在低浓度下就能获得好的分离效果，则尽可能用低浓度。
另外，不仅要看你的缓冲盐浓度，而且还要注意有机相的比例，有机相比例越高，越容易析出。另外，还要注意洗脱程序，若是梯度洗脱，一般有机相比例是从低到高，初始洗脱时，缓冲盐在低比例有机相中是溶解的，但随着梯度洗脱的进行，有机相比例升高，缓冲盐溶解度下降则会析出，不知你用的是否梯度洗脱。另外，你可以先用水相（含缓冲盐）和最高比例的有机相混合，看溶液是否澄清，若是澄清的，则OK了。

unknow[使用道具]
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发表于 2010-12-20 17:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 kuailedeadai 的帖子

事实证明，你的40mmol/L的盐浓度确实析出了，这可能是因为你有机相比例浓度较高的原因。你这个浓度跟我们离子色谱缓冲盐的浓度相当了，离子色谱用的可是纯水！

反相色谱中缓冲盐能少加就尽量少加，按老师说的，少加点盐看效果吧。
你加缓冲盐是参考的文献？不知道你课题的重点是不是在分析这块，其实有兴趣的话完全可以找到不加缓冲盐就达到好的效果的分析条件。

hewen0925[使用道具]
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发表于 2010-12-20 19:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

操作问题。用了缓冲盐，要注意流动相过度，控制有机相的量。

jianghai[使用道具]
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发表于 2010-12-20 19:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你按你使用的比例，用烧杯混合一下，看看有盐析出没？

40，不高啊，你用的盐是什么？

我用50的磷酸盐没什么问题啊

haohaorenjia[使用道具]
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发表于 2010-12-20 19:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 kuailedeadai 的帖子

取决于你的缓冲盐在有机溶剂中的溶解度。浓度不要太大，5-20mM左右。然后调整合适的pH值，估计作用更大一些。

楼主看看帖子也许对你会有帮助。

分享：反相色谱中如何选择缓冲液？
cuturl('http://bbs.antpedia.com/viewthread.php?tid=38147&extra=page%3D1')

[ 本帖最后由 haohaorenjia 于 2010-12-20 19:53 编辑 ]

健康千万家[使用道具]
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发表于 2010-12-20 19:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

流动相缓冲盐和有机相比例是不是比较大，或者你走的是梯度，梯度太大。
如果你不能确信什么时候会析出盐，你按照一定的比例混合下看看有没有结晶就知道了。

nowait1983[使用道具]
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发表于 2010-12-20 19:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这个只有不是100%的有机溶剂，应该不会析出结晶

q_r_epcnge[使用道具]
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发表于 2010-12-20 19:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

50mM及以下都不算高，你是在什么条件下析出的能不能说清楚点。

fqdfi32[使用道具]
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发表于 2010-12-20 19:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你是单独一个泵走缓冲液,还是含缓冲液的有机相一个泵!

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