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扫描电镜观察的是样品表面的结构,在取材时要注意避免挤压损伤、避免外力对观察面的损伤和破坏,这是整个样品制备过程中的关键步骤之一。
其主要要求有以下几点:
1.取材前应作好准备,包括药品、器材和根据实验的目的与需要制定的取材方案等。每次取材的品种及数量不宜过多,以免延误时间,影响制样效果。
2.取材部位要准确,相互对照的样品尽可能取同一部位。取材大小要适当,以观察表面结构为主的样品可以大一些,其直径最大不宜超过5mm,高度可在3~5mm之间;以观察内部结构为主的样品,其直径应小于2mm,高度可在3mm左右。为了提高后续步骤的效果,在满足所需观察内容的条件下,样品块以尽量小一些为宜。
3.为了使被观察的样品更接近于活体状态,材料应尽量新鲜。取材用的刀片要锋利,同时应作好对样品观察面的标记。
关于生物样品(主要指组织细胞)取材的具体方法,与一般透射电镜超薄切片法基本相同;组织离体前在玻璃平皿内放入冰块。冰块上放一牙科蜡板(或软塑料板),并在蜡板上滴加少量组织固定液。组织离体后,不需特殊清洗者应立即将样品放入上述蜡板固定液内,用锋利的刮脸刀片将样品修成所需大小需要清洗的样品。则经清洗以后再按上述方法修块。
清洗