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标题:【求助】转化涂板

101010[使用道具]
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1
 

【求助】转化涂板

谁知道这是怎么回事,每次转化涂板都涂成这样。涂板后16h就长好了 ,有蓝白斑。求指点


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2015-2-13 16:16
08282012342.jpg (639.14 KB)
 
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wawa[使用道具]
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卫星菌落太多了,缩短培养时间,至少缩短4-5个小时
不过只要能够挑出主菌落,微卫星影响不死很大,你这个时间太长了
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october7[使用道具]
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转化菌浓度太高,可以尝试降低浓度然后再进行涂板,这么高的密度也不利于单一菌落的挑选。
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mnstyle[使用道具]
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转化后复苏40分钟就行,然后涂板、过12小时你看看,应该就可以挑菌了
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QUOTE:
原帖由 wawa 于 2015-2-13 16:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

卫星菌落太多了,缩短培养时间,至少缩短4-5个小时
不过只要能够挑出主菌落,微卫星影响不死很大,你这个时间太长了

这样单菌落长的不是很大
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101010[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 october7 于 2015-2-13 16:16 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
转化菌浓度太高,可以尝试降低浓度然后再进行涂板,这么高的密度也不利于单一菌落的挑选。

嗯  做了个100ul和150ul的梯度,可是2个板都长成这样了。有没有可能是涂的时间过长,导致菌分裂?
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7
 
长太久了,都出卫星菌落了,下一次大大概8-12h左右就可以了,然后放到4℃30min到1h左右显色就可以挑斑了
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PINK[使用道具]
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平板时间过长,或者加的抗生素过少,我以前也遇到过
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831226[使用道具]
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载体和片段浓度太大了,适量减少。我一般2ul目的片度加1ul载体,目的片段浓度基本在100ng/ul以内,效果比较好,都是单菌落,不会长成一片一片的
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101010[使用道具]
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载体和片段浓度太大了,适量减少。我一般2ul目的片度加1ul载体,目的片段浓度基本在100ng/ul以内,效果比较 ...

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