小中大水产饲料离体消化率测定方法及其应用
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水产饲料离体消化率测定方法及其应用
1 基本原理
离体消化率测定的基本原理是模拟试验动物的消化生理条件,以动物消化道内酶液或人工酶液为消化酶,利用酶催化反应的作用原理,在试管、三角瓶等容器内对饲料物质进行离体消化水解作用,对水解后饲料进行过滤或离心处理,以得到其残渣。将溶解于水体的饲料物质或饲料成分视为已经被消化了的产物,分析消化前饲料和消化后残渣的量或营养成分量,以此计算饲料或饲料成分的消化率:
消化率(%)=[(饲料量或饲料某营养成分量-残渣量或残渣某营养成分量)/饲料量或饲料某营养成分量]×100
离体消化率计算方法类似于全收粪消化率测定方法,是以消化前后饲料或饲料成分的绝对量差值(溶解于水中的量)占消化前饲料或饲料成分量的百分比计算消化率。
离体消化率与在体消化率有何差异?离体消化率测定意义何在?与在体消化率测定相比较,离体消化率测定可以在实验室内进行,工作量大大减少;可以进行批量测定试验,这是在体消化率测定难以达到的;可以在较短时间内得到试验结果,大大缩短了试验时间。这是离体消化率测定方法的重要优点,也是得以发展的主要依据。
那么是否可以用离体消化率结果代替在体消化率呢?我们分析一下在体与离体消化率测定的主要条件差异:(1)消化反应的环境条件如温度、酸碱度及反应产物的积累条件(在体条件下消化产物随时被动物肠道吸收、转运走了)等有很大的差异,这些可能使反应速度发生变化,要求离体消化率测定时尽可能模拟在体动物的条件;(2)在体消化率计算时被消化吸收的量是被动物消化道吸收的量,而离体消化率测定时为溶解于水体的饲料或饲料成分量作为被吸收的量;(3)消化酶种类和数量有很大的差异,在体条件下消化酶是一类对饲料物质起消化作用的消化酶群体,同时细胞或消化腺分泌的消化酶不断进入消化道产生作用,而离体消化酶主要依赖于人为添加,在种类上和消化酶的补充方面难以与在体条件相比较。因此,离体消化率与在体消化率结果有一定的差异。但是,如果在消化酶反应条件、消化反应过程等方面尽可能模拟活体动物的条件,稳定消化酶的种类和数量,经过大量试验后将离体消化率测定结果与在体消化率测定结果进行相关分析,在求得两者的相关系数后以离体消化率测定结果换算一定系数后就可以推算出在体消化率的结果。这在畜禽动物饲料消化率测定、营养评价方面已经得到很好的应用,水产动物离体消化率测定方法也在向这方面发展。
离体消化率测定结果除了尽可能代替在体消化率结果外,在其他方面也有重要的作用。首先,在饲料原料和配合饲料质量检验时可以使用离体消化率,此时只需要在相同的条件下以消化率大小对饲料原料或配合饲料进行可消化性评价,并不需要用离体消化率的大小来替代在体消化率。例如在饲料原料真假和营养价值鉴定时,如果原料中掺入了不易消化的物质则可以采用离体消化率测定方法进行鉴别和鉴定。例如在鱼粉中掺入了不容易消化的角蛋白(如羽毛粉、皮革粉、蹄角粉等)、血粉等物质时,如果仅以蛋白质含量或氨基酸总量就难以进行鉴定和鉴别,此时可以将待测鱼粉与标准鱼粉在相同试验条件下作离体消化率测定,比较两种鱼粉的消化率大小就可以对待测鱼粉是否掺假作出判定。我们在对一种肉松状鱼粉进行质量鉴定时,其离体消化率与标准鱼粉的结果相差达到了20个百分点,结合显微镜分析该种鱼粉实际上为掺入了膨化毛发、羽毛粉的鱼粉。
在评价配合饲料的可消化性时,如果只是比较不同配方或不同生产厂家的配合饲料的可消化性,就可以在相同条件下对不同的配合饲料进行离体消化率测定,以离体消化率的大小认定为不同配合饲料的可消化性。在对大批量饲料原料进行营养价值和生物利用评价时,如果采用在体消化率测定就需要很长的时间和大量的工作量才能得到结果,此时也可以采用离体消化率测定方法在较短的时间内获得结果。例如在针对不同养殖对象的饲料原料选择时,可以利用该种养殖动物的消化酶作为离体消化的消化酶,对所有原料进行离体消化率的测定,根据所得消化率结果,尽可能选择对该种动物消化率高的饲料原料组成饲料配方,这样可以使配合饲料的消化率保持很高的水平。例如在我们以前的试验中,在相同的试验条件下大口鲶对蚕蛹蛋白质的离体消化率为55.53%、长吻鲟为14.74%、鲤鱼为 53.21%,因此在大口鲶和鲤鱼的配合饲料中就可以使用蚕蛹,而长吻鲟配合饲料中则不宜使用蚕蛹。类似的在对不同生产厂家和产地的饲料原料、对新的饲料原料进行选用时也可以依据离体消化率的结果作为依据之一。