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标题:[未解决]液相色谱检测蛋白问题！谢谢！

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
suosuosky[使用道具]
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发表于 2011-1-28 14:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

液相色谱检测蛋白问题！谢谢！

液相色谱为什么有时候检测蛋白用214nm，有时候用280nm啊？
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feiteng666[使用道具]
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发表于 2011-1-30 15:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个可能是根据各品种所含物质的是否有影响吧!
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chongwenmen[使用道具]
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发表于 2011-1-30 15:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我好象记得一些存在发光基团，例如含有苯环的氨基酸，苯环中能够和孤对电子发生π—n共轭，280nm有吸收，用到280nm的吧，一般是色氨酸、酪氨酸以及苯丙氨酸有吸收。214nm在紫外光比较靠前，属于末端吸收了吧。能量比较大。检测所有的吧。
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suosuosky[使用道具]
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发表于 2011-1-30 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
会不会与所用的流动相的不同有关系呢？论坛里我也搜了，没有相关的帖子，请大家答疑解惑，感谢。
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小蹄子[使用道具]
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发表于 2011-2-1 07:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 suosuosky 的帖子

不管选择多少波长，都是为了提高待检物的响应值。280nm是因为有色氨酸残基，214nm是考虑到了组氨酸残基。你也可以通过紫外扫描，使用能使响应值更高且更稳定的波长。

[ 本帖最后由 小蹄子 于 2011-2-1 07:53 编辑 ]
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gamewang[使用道具]
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发表于 2011-2-10 11:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
记得好像和组成蛋白的氨基酸有关系吧，普通的氨基酸最大吸收是214nm，好像是Trp最大吸收是280nm。
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hplcangel[使用道具]
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发表于 2011-2-10 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般多肽都用215or280nm单波长检测
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trymybestchy[使用道具]
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发表于 2011-2-10 13:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般肽键在214都有吸收，所以214nm可以用来监测所有氨基酸。280nm是几个芳香族氨基酸的吸收峰，按照蛋白质序列，可以计算每个蛋白质在280nm的吸收系数，所以280nm的吸收是可以用来给蛋白质定量的。
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