液质联用

请教：我们用LC/MS/MS做黄酮苷血样，用乙酸乙酯液液萃取的方法，提取回收率(血样中样品测定值与对照品溶液测定值之比）只有30%，如何提高提取回收率，我们还试了加饱和中性盐去除出蛋白后再用乙酸乙酯提取，效果不好，甲醇直接蛋白沉淀发生离子抑制,有哪位大侠做过苷类的液质联用，请提出宝贵意见，万分感谢！提取回收率一定要大于50%吗？若我灵敏度能达到1ng左右？

建议加盐酸酸化血浆后，用乙酸乙酯萃取。我做过，回收率能达到60％左右。

多谢！具体做法能讲一下吗？

我查到一篇文献是做黄酮苷的，它是这样做的：

1.5　样品前处理　向50μｌ血浆样品中加入10μｌ的ＩＳ溶液(200ｎｇ•ｍｌ-1),混匀,再用10μｌ的ＨＣｌ溶液(0.20ｍｏｌ•Ｌ-1)酸化,于1600ｒ•ｍｉｎ-1振摇5ｍｉｎ。再用1000μｌＥｔＯＡｃ提取。吸取上清液800μｌ,并用氮气吹除溶剂。将提取残留物用70μｌＭｅＯＨ：Ｈ2Ｏ(40：60,ｖ/ｖ,含0.03%ＨＣＯＯＮＨ4)溶解,离心后,取上清液(20μｌ)进行ＬＣ/ＭＳ/ＭＳ分析。

楼上说得很多了

剩下的就是减小噪声

现在对提取回收率没有特别的要求了，主要是能达到检测要求，稳定就行了。

哪有规定不？

血浆提取率绝对回收率按照血样中样品峰面积值与对照品溶液峰面积值之比，最多只有40%，按照令种算法（也叫绝对回收率）：血浆样品的峰面积/内标峰面积（Ai/Asi）与对照溶液样品的峰面积/内标峰面积（A0/Aso）之比来计算，能在100%左右，常超过100%，哪种算法在申报时常用？我们使用了内标的。