[ 实验目的]
糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一，也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。不同载培条件，不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定，可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。
了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理；掌握分光光度计的使用
[ 实验原理]
蒽酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法，在强酸性条件下，蒽酮可以与游离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（还原性和非还原性）作用生成蓝绿色的糖醛衍生物，其颜色的深浅与糖的含量在一定范围内成正比。蒽酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。当存在含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。上述特定的糖类物质，反应较稳定。该法特点：灵敏度高，测定量少，快速方便。
反应式：
[ 材料、仪器及试剂]
1．材料：白菜叶、柑桔
2．仪器：分光光度计 恒温水箱 20ml具塞刻度试管（3支） 漏斗 100ml容量瓶 刻度试管 试管架 剪刀 研钵
3．试剂：
（1）200μg/ml标准葡萄糖：AR级葡萄糖100mg，蒸馏水溶解，定容至500ml。
（2）蒽酮试剂：1g蒽酮，用乙酸乙酯溶解，定容至50ml，棕色瓶避光处贮藏；
（3）浓硫酸
[实验方法 ]
1．葡萄糖标准曲线的制作
取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。
parsetable('', '', '[tr][td=1,1,238]
管 号
[/td][td]
1
[/td][td=1,1,51]
2
[/td][td]
3
[/td][td=1,1,51]
4
[/td][td]
5
[/td][td=1,1,51]
6
[/td][/tr][tr][td]
标准葡萄糖原液(ml)(200μg/ml)
[/td][td=1,1,51]
0
[/td][td]
0.2
[/td][td=1,1,51]
0.4
[/td][td]
0.6
[/td][td=1,1,51]
0.8
[/td][td]
1.0
[/td][/tr][tr][td=1,1,238]
蒸 馏 水
[/td][td]
2.0
[/td][td=1,1,51]
1.8
[/td][td]
1.6
[/td][td=1,1,51]
1.4
[/td][td]
1.2
[/td][td=1,1,51]
1.0
[/td][/tr][tr][td]
葡萄糖含量（μg）
[/td][td=1,1,51]
0
[/td][td]
40
[/td][td=1,1,51]
80
[/td][td]
120
[/td][td=1,1,51]
160
[/td][td]
200
[/td][/tr]')
2．样品中可溶性糖的提取
称取1克白菜叶，剪碎，置于研钵中，加入少量蒸馏水，研磨成匀浆，然后转入20ml刻度试管中，用10ml蒸馏水分次洗涤研钵，洗液一并转入刻度试管中。置沸水浴中加盖煮沸10分钟，冷却后过滤，滤液收集于100ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀备用。
3．糖含量测定
用移液管吸收1ml提取液于20ml具塞刻度试管中，加1ml水和0.5ml蒽酮试剂。再缓慢加入5ml浓H2SO4（注意：浓硫酸遇水会产生大量的热！），盖上试管塞后，轻轻摇匀，再置沸水浴中10分钟（比色空白用2ml蒸馏水与0.5ml蒽酮试剂混合，并一同于沸水浴保温10分钟）。冷却至室温后，在波长620nm下比色，记录光密度值。查标准曲线上得知对应的葡萄糖含量（μg）。
[结果计算]
parsetable('', '', '[tr][td=1,2,201]
样品含糖量（g/100g鲜重）=
[/td][td]
查表所得糖含量（μg）×稀释倍数
[/td][td=1,2,57]
×100
[/td][/tr][tr][td]
样品重（g）×106
[/td][/tr]')
[附注]
（1）加浓H2SO4时应缓慢加入，以免产生大量热量而爆沸，灼伤皮肤，如出现上述情况，应迅速用自来水冲洗。
（2）水浴加热时应打开试管塞。
