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标题:[未解决]奶粉中单核苷酸的检测方法探索

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
liuminge[使用道具]
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奶粉中单核苷酸的检测方法探索

最近在摸索奶粉中单核苷酸的液质方法,各位大侠们有没有做过的?给提供点建议。
峰一直都分的不好,灵敏度也上不去
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  • miracle   2011-3-2 21:25  可用分  +2   鼓励坛友发起话题交流!欢迎常来! ...
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unknow[使用道具]
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回复 #1 liuminge 的帖子

对于核苷酸的LCMS分析,有文献用下面这个条件的:cuturl('http://www.chnfood.cn/data/upload//download/050145_u0ochW.pdf')
1、色谱条件:
色谱柱:ZORBAX ODS 4.6mm 25cm(5 m)
流动相:含0.05% H3PO4 的水- 甲醇(90/10 V/V)体系
流速1.0ml/min 柱温25  检测波长260nm
2、质谱条件:
电喷雾正离子检测接口参数毛细管电压
3500V 一级锥孔电压46V 二级锥孔电压5V RF 透
镜电压0.49V 离子源温120 脱溶温度250 离
子能量1.0V 低质量分辨12.5 高质量分辨12.5 倍
增器电压650V 扫描范围m/z 160 400

你用的是什么条件?流动相里应该加点酸抑制磷酸根的解离,可以改善峰型。分离度不好就增加水的比例。
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liuminge[使用道具]
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回复 #2 unknow 的帖子

用的0.1%甲酸做的流动相,因为后面的质谱系统,不敢加磷酸缓冲液呀。
我有看到文献说如果在流动相里加少少磷酸,能改善拖尾。
我用的sysmetry的柱子,水/乙腈 99:1
GMP跟UMP峰型尤其差
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haohaorenjia[使用道具]
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回复 #1 liuminge 的帖子

是否是 GMP, IMP 类的核苷酸?液质方法没有用过。但是可以使用离子交换色谱方法来测试。  好像日立有款离子色谱柱,专门测试 GMP, IMP等物质。用到的流动相也很简单。 用UV=280nm。
奶粉好像要去除蛋白质等物质,在进行测试吧。
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