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标题:[未解决]如何根据多肽来选择不同的柱子呢？

  [未解决]本主题悬赏 可用分 1  
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发表于 2015-3-13 19:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如何根据多肽来选择不同的柱子呢？

用HPLC分离多肽，如何根据多肽来选择不同的柱子呢？C4/C8/C18
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mico_11[使用道具]
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发表于 2015-3-13 19:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般用C18就够了，但是要注意填料的孔径。
小分子多肽用100A左右的填料，大分子的要用300A的填料。
C8的保留比C18弱，其他性质都差不多。
记得在流动相里加0.1%的TFA，改善峰型的。
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发表于 2015-3-13 19:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不给载气就升温，就算温度没超过上线，柱子都得废掉，你这种情况柱子基本已经废了。
安捷伦的仪器如果你前后路的色谱柱信息都设置对的话，你不可能能将温度升到115以上，你这种情况肯定没将后路的色谱柱信息设置对
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发表于 2015-3-13 20:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
C4，C8，C18主要就是保留能力和稳定性的区别。
保留能力和稳定性随着烷基长度的增加而增强。比如：C4就可以分离在C18上保留过强的物质。
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发表于 2015-3-13 20:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个需要结合你具体的条件的。你可以先把柱子好好冲一冲，也看看柱效怎么样了。还有就是你主峰后面那个杂质没分开
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发表于 2015-3-13 20:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
C18 啊 ， 基本上是通用的柱子，可分析检测大如多肽类物质，同样可以检测小分子。如果是多肽流动相建议考虑乙腈和水系统，TFA 0.05%。基本上可以搞定。
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发表于 2015-3-13 20:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
根据分子量大小来选择，一般C18柱作为通用柱对大多多肽都适用，对于一些酸性、碱性甚至难溶性肽可能还要用到PLRP柱。
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发表于 2015-3-13 20:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1.根据分子量判断孔径的选择，分子量大的选择300A孔径（比较常用）；2.根据蛋白的极性和电荷判断流动相，一般尽量使用水相流动相，适当改变PH值来优化条件。
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mr.henry[使用道具]
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发表于 2015-3-13 20:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上基本都对。如果你有这么多柱子可以做对比试验。
我也就用过C18，其他公司都没有提供过。
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娜爷~[使用道具]
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发表于 2015-3-13 20:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果是买新柱，建议C4或C8，300A的。如果只能在现有柱子里找，那就拿标样走走试试，哪个出峰漂亮用哪个。注意除了很短的肽以外有机相不要加太多，以免沉淀。一般60%左右顶天了。
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