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标题:【求助】 pEGFP-N1表达载体可以在果蝇细胞系中表达吗?

##蒙奇奇[使用道具]
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【求助】 pEGFP-N1表达载体可以在果蝇细胞系中表达吗?

最近想做真核细胞表达实验,用pEGFP-N1表达载体作为目的基因的表达载体,之前没有做过这方面的研究,不知道pEGFP-N1能不能在果蝇细胞系中表达呢?请各位大侠不吝赐教!
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考拉乌拉拉[使用道具]
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这个载体是真核表达载体
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##蒙奇奇[使用道具]
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原帖由 考拉乌拉拉 于 2015-3-16 17:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这个载体是真核表达载体

果蝇细胞系不也是真核的吗?
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考拉乌拉拉[使用道具]
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原帖由 ##蒙奇奇 于 2015-3-16 17:01 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

果蝇细胞系不也是真核的吗?

果蝇是真核生物的,该载体应该可以使用!
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lixi559[使用道具]
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理论上应该是可以的,我们实验室用的是pEGFP-C1,在肿瘤细胞中是能够表达的
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##蒙奇奇[使用道具]
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原帖由 lixi559 于 2015-3-16 17:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

理论上应该是可以的,我们实验室用的是pEGFP-C1,在肿瘤细胞中是能够表达的

是人的肿瘤细胞吗?
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lixi559[使用道具]
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原帖由 ##蒙奇奇 于 2015-3-16 17:02 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

是人的肿瘤细胞吗?

是的
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gemei0115[使用道具]
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应该不可以,pEGFP-N1 是CMV的promoter,Human cytomegalovirus (CMV) immediate early promoter,果蝇的细胞系诸如S2,S2R+应该不能启动该promoter
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gemei0115[使用道具]
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再补充一点吧! The accumulating dogma seems to indicate that CMV expresses in a number of cell types. For example, CMV drives expression in frog oocytes. The following articles discuss the CMV promoter inS2 cells. One provides evidence that it works well and one finds that it does not. Indicates that CMV promoter does not work in Kc1 and S2 cells: Gene 1997 Apr 1;188(2):183-90 Pfeifer TA, Hegedus DD, Grigliatti TA, Theilmann DA Baculovirus immediate-early promoter-mediated expression of the Zeocin resistance gene for use as a dominant selectable marker in dipteran and lepidopteran insect cell lines. Demonstrates that CMV promoter does work in Drosophila cells: Nucleic Acids Res 1987 Mar 11;15(5):2392 Sinclair JH The human cytomegalovirus immediate early gene promoter is a strong promoter in cultured Drosophila melanogaster cells.
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