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标题:【求助】细胞培养和提取RNA的先后顺序

feiya[使用道具]
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发表于 2015-3-16 17:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞培养和提取RNA的先后顺序


本人的实验要培养鱼的细胞，同时也要提取总RNA。

想问一下各位，活鱼解剖之后是立马培养细胞呢还是先提取总RNA？两个似乎都要新鲜的组织。

但我一个人不可能同时去做这么多，哪一个可以先放下？比如说，先将组织冻存起来，对细胞培养和提取RNA的影响，

哪一个会小一点
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发表于 2015-3-16 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
提RNA只需1天，培养细胞要几天。且两者是平行的，细胞放上培养基就好了，有纠结的时间早做好一样了
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 小中大

提取RNA
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 小中大

如果将提取RNA的组织速冻后再解冻提取，容易造成RNA的分解。建议先提RNA！最好是花点钱，请别人帮你做其中一个，这样就两不耽误了！
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发表于 2015-3-16 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

您好，很高兴为解答。

如果两者不能同时进行的话建议先提取总RNA。相比于DNA的稳定性，RNA含量在细胞中是多变的，当细胞新陈代谢速度加快时，蛋白质合成速率加快，RNA含量会增加，反之减少。另外，RNA降解速度较快，不建议冷冻保存，应及早进行提取。
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发表于 2015-3-16 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
提RNA只需1天，培养细胞要几天。且两者是平行的，细胞放上培养基就好了，有纠结的时间早做好一样了

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这是两个不同的实验啊。一个人实在同时完不成
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feiya[使用道具]
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发表于 2015-3-16 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果将提取RNA的组织速冻后再解冻提取，容易造成RNA的分解。建议先提RNA！最好是花点钱，请别人帮你做其中一 ...

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如果组织细胞冻存起来，再解冻培养，行不行呢
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feiya[使用道具]
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发表于 2015-3-16 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
您好，很高兴为解答。

如果两者不能同时进行的话建议先提取总RNA。相比于DNA的稳定性，RNA含量在细胞中是 ...

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嗯，谢谢了，很有用。那么如果组织细胞冻存起来，再解冻培养，行不行呢。而且如果冻存组织，多少度的合适呢。不用太久，提取完RNA就开始培养细胞
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bangqi_k[使用道具]
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发表于 2015-3-16 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
嗯，谢谢了，很有用。那么如果组织细胞冻存起来，再解冻培养，行不行呢。而且如果冻存组织，多少度的合适 ...

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组织可放在4°冰箱，最多保存60h左右
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vera+[使用道具]
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发表于 2015-3-16 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

您好，很高兴为解答。

如果两者不能同时进行的话建议先提取总RNA。相比于DNA的稳定性，RNA含量在细胞中是多变的，当细胞新陈代谢速度加快时，蛋白质合成速率加快，RNA含量会增加，反之减少。另外，RNA降解速度较快，不建议冷冻保存，应及早进行提取。可使用流式细胞分析技术测量总RNA含量。
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