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标题:【求助】线粒体DNA提取

am10[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】线粒体DNA提取

有老师想做线粒体DNA的测序，但是在线粒体DNA的提取这一步遇到了麻烦。不知有哪位老师有类似的成果经验，请分享一下呗！
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zwsyrt[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

直接提总DNA，把它作为模板PCR就行了
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qianqin1977[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
具体什么麻烦你说一下 提不出来吗？从什么样品提取?
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发表于 2015-3-17 09:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

好像应该要梯度离心拿到线粒体再做下步打算的吧
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am10[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 qianqin1977 于 2015-3-17 09:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
具体什么麻烦你说一下 提不出来吗？从什么样品提取?

鱼的，量不够！
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xue258[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
提总DNA吧，然后用qiagen的一个试剂盒来弄
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
同意提总DNA,之前有看过这方面的再用ｋｉｔ做
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发表于 2015-3-17 09:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
提总DNA就行，然后设计线粒体DNA的扩增引物就行了。
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lyxsqs[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼上的办法都可以试试，看哪种提的效果更好
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dreaming[使用道具]
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发表于 2015-3-17 09:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果想做线粒体全基因组测序，提总DNA是不行的。要像5楼说的那样，先把线粒体离心出来，再破碎线粒体，提取里面的核酸DNA，送去测序。提线粒体最好的方法就是梯度离心，叶绿体和线粒体分别可以提取出来，具体方法在网上搜点外文文献就行了。
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