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标题:【求助】液相质谱法测多肽药物，有了解的吗？

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 小中大

【求助】液相质谱法测多肽药物，有了解的吗？

液相质谱法测多肽药物，有了解的吗？求教~~~~~~~
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 小中大
看看文献

你说的太大了，具体一点儿，最好具体到某个样品，网上转载了一篇文章，希望能沾边。祝你好运！

高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中九种磺胺类药物的残留量

                                                     陈文慧

                               (海南出入境检验检疫局,海口570311)

    摘　要:建立了饲料中九种磺胺类(SAs)药物残留量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定方法。试样经乙腈提取,碱性氧化铝柱净化处理。采用LC-MS/MS选择反应监测正离子模式测定,同时对饲料中的九种SAs进行定性和定量。在0 ~200μg/L范围内,九种SAs的线性相关系数( r)均大于0·9975。通过实际样品的添加回收实验,方法的检出限为2 mg/kg, 3个添加水平的回收率范围为76·0%~114·0%,相对标准偏差小于11%。方法适用于磺胺类药物在饲料中的残留检测和确证。

    关键词:磺胺类药物,饲料,液相色谱-质谱/质谱

    中图分类号: O657·63　　文献标识码: A　　文章编号: 1000-0720(2010)09-052-05

    测定磺胺类残留量常用的方法包括酶联免疫法、高效液相色谱-紫外检测法[1-5]和高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)[5, 6]。HPLC-MS/MS的抗干扰能力强,检出限低,无需强调分离,已逐渐作为SAs残留检测的首选方法。目前已发表的关于测定SAs残留的方法几乎都集中在禽肉类产品、水产品和奶制品上。饲料样品的性质决定了一般针对禽肉等产品的样品前处理方法不适用于饲料样品。饲料中SAs的测定,已有国家标准[3, 4]。与标准相比,本方法适用于检测的药物品种更广。

    本文通过比较饲料中SAs残留的不同提取方法,最终利用乙腈溶液溶解并提取SAs分析物,碱性氧化铝柱净化后,采用HPLC-MS/MS同时测定九种SAs残留,检出限达到2 mg/kg。
    1　实验部分
    1·1　仪器与试剂
    高效液相色谱-串联质谱仪(美国ABI公司);组织捣碎机;孔筛(孔径1 mm);电子分析天平AE240;具塞锥形瓶(150 mL); IKA MS3 digital旋涡混合器; 320R冷冻离心机;氮吹仪;碱性氧化铝小柱(Cleanert Alumina-B-SPE, 1000 mg6mL,用前分别用10 mL乙腈淋洗。保持柱体湿润)。
    乙酸铵(色谱级);磺胺嘧啶( sulfadiazine,SD)、磺胺甲基嘧啶(sulfamerazine, SMR)、磺胺二甲基嘧啶(sulfamethazine, SDD)、磺胺甲氧哒嗪(sulfamethoxypyridazine, SMP)、磺胺间甲氧嘧啶(sulfamonomethoxine, SMM)、磺胺甲噁唑(sul-famethoxazole, SMZ)、磺胺二甲氧嘧啶(sulfadim-ethoxine, SDM)、磺胺喹噁啉(sulfaquinoxaline,SQX)、磺胺氯哒嗪( sulfachloropyridazine, SCP)等9种磺胺类药物标准品(纯度≥98·0% );甲醇、已腈、甲酸、冰乙酸为(色谱纯);水为GB/T6682规定的一级水;其它试剂均为国产分析纯。
    1·2　溶液的配制
    定容液:准确移取3 mL冰乙酸,加入250 mL乙腈,再用水定容至1000 mL,混匀,过0·2μm有机系微孔滤膜,脱气,备用。
    标准储备液:分别准确称取磺胺嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺氯哒嗪、磺胺甲氧哒嗪、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉和磺胺甲噁唑10·0 mg(准确至0·1 mg),置于25 mL容量瓶,用少量甲醇溶解,并用甲醇定容至刻度,混匀,浓度为400μg/mL浓度。该标准储备液置于4℃冷藏避光保存,保存期为六个月;混合标准储备液:分别准确量取适量的九种磺胺类药物标准储备液,用甲醇稀释成50μg/mL的混合标准储备液,该混合标准溶液置于4℃冷藏避光保存,保存期为3个月;混合中间标准溶液:准确量取适量的混合标准储备液,用甲醇稀释成1μg/mL的标准中间液,该中间标准溶液置于4℃冷藏避光保存,保存期为3个月;混合标准工作溶液:根据需要准确量取适量的混合中间标准溶液,用定容液配制成适合浓度的的标准工作液。
    1·3　样品处理
    取有代表性的样品,经粉碎,全部过1 mm孔筛。制样操作过程中必须防止样品受到污染。称取2 g试样(精确至0·01 g),置于具塞锥形瓶中,加入50 mL乙腈,于涡旋振荡器振荡2 min,水浴超声30min。取上清液约5·0mL于带盖离心管, 12 000 r/min高速离心10 min。准确吸取1·0 mL澄清液,加入已加有6 mL乙腈的试管中,于涡旋振荡器振荡30 s。将提取液移入用10 mL乙腈淋洗过的碱性氧化铝小柱,令其自然流速流出。待提取液全部流出后,吹干,用4 mL定容液洗脱,收集洗脱液,过0·2μm有机系微孔滤膜,供液相色谱-串联质谱测定。
    1·4　液相色谱-质谱/质谱测定
    1·4·1　色谱条件
    色谱柱: C18柱, 4·6 mm×150 mm, 5μm,流动相:甲醇(A)和0·50 mmol/L乙酸铵溶液(B);梯度程序: 20% A(0~2min), 20% A~90%A(2~7 min), 90% A~20% A(7~7·5 min),20% A(7·5~12 min);流速: 0·80 mL/min;柱温: 30℃;进样量: 50μL。
    1·4·2　质谱条件
    离子源:电喷雾离子源ESI,正离子模式;监测模式:多反应监测(MRM);气帘气、雾化气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气;使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求,气帘气(CUR): 0·4 MPa;雾化气(GS1): 0·6MPa;辅助加热气(GS2): 0·7 MPa;碰撞气(CAD): 0·4 MPa;离子源喷雾器电压( IS):5500·0 V;喷雾针温度: (TEM): 450·0℃。其它参数见表1。


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 小中大
2·结果与讨论
    2·1　样品提取
    因磺胺类药物为极性物质,易溶于极性有机溶剂,而难溶于非极性溶剂,一般选用乙腈、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮等极性有机溶剂液液萃取[7]。采用乙腈作提取溶剂,提取效率较低,但增加提取溶剂的量,可获得满意的回收率,另外用乙腈提取时共提的杂质也较少。分别考察了涡旋、超声波振荡和涡旋后再超声波振荡3种提取方式。结果表明涡旋后再超声波振荡的提取方式较好,而且回收率比较稳定,特别注意,磺胺类药物在高温、光线直射、空气暴露等环境条件下,会部分降解氧化损失,故在样品提取净化操作过程中,要尽可能在避光、室温小于25℃条件下操作,所用的器皿也应尽可能采用棕色。
    2·2　样品净化
    由于磺胺具有可离子化和极性强等性质,SPE柱可选用正相柱或离子交换柱,文献报道用于净化的SPE柱有Sep-Pak硅胶柱[8]、氨基键合柱[9]、Oasis HLB[10]、Oasis MCX[11]、Bond-ElutC18[12]、PSA、SCX[13]、氧化铝柱[5]等。三氯甲烷提取过硅胶柱后回收率较低,而Na2EDTA-Mcllvaine液提取/OasisHLB净化体系回收率在40%~80%之间,且不稳定,乙腈提取/氧化铝柱净化和乙腈提取/正己烷分配4种提取净化体系。
    方法回收率和净化效果都较好。本方法选用的碱性氧化铝柱为正相柱,洗脱溶剂黏滞系数小,自然状态下很快流干,操作较简单。由于磺胺的热不稳定性,在浓缩过程中可加入少量的正丙醇或异丙醇,以避免磺胺的分解。
    2·3　液相色谱-质谱条件优化
    以甲醇-水为流动相时, SAs几乎在同一时间被洗脱,这可能是由于这些化合物在中性流动相中具有相同的保留因子。虽然质谱分析并不要求在色谱柱上完全分离,但所要分析的SAs药物中存在母离子和子离子均相同的化合物(如磺胺间甲氧嘧啶和磺胺甲氧哒嗪),对于这类化合物的质谱分析则要求必须在色谱柱上完全分离,否则会互相干扰测定。采用0·1%甲酸来控制流动相的pH值,同时在流动相的水相中加入挥发性电解质乙酸铵,可以在保持较好分离度的前提下获得理想的色谱峰,减小加合峰,增大分子离子峰的峰强度。
    2·4　定量分析方法评价
    2·4·1　线性范围、回归方程、相关系数以及检出限　进行样品测定时,若样品的色谱峰保留时间与标准品保留一致,并且扣除背景后的样品谱图中各定性离子的相对丰度与浓度接近的同样条件下得到的标准溶液谱图相比,最大允许相对偏差不超过规定的范围,则可判断样品中存在对应的被测物。在质量浓度为0 ~200μg/L时,以峰面积为纵坐标,标准工作溶液的质量浓度浓度(μg/L)为横坐标,绘制标准工作曲线。用标准工作曲线对样品进行定量,样品溶液中待测物的响应值应在仪器测定的线性范围内。当样品中的磺胺类药物超过此线性范围时,可适当加大样品的稀释倍数。
    将所配制的系列浓度标准溶液,经仪器测定,最低检测限以信噪比S/N=3计算,最低定量限以信噪比S/N=10计算。方法定量下限(S/N=10)均低于2 mg/kg。线性范围、回归方程、相关系数以及方法检出限见表2。


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2·4·2　回收率和精密度　以不含磺胺类药物的试样作为基质,进行三个浓度水平的添加回收实验,每个水平做6次平行,其回收率与精密度分别见下表。


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 小中大
应用本液相色谱-串联质谱法测定饲料中九种磺胺类药物的平均回收率为76·0%~114·0%;相对标准偏差<11%。
参考文献
[1]泰　燕,张美金,林海丹等·分析测试学报, 2004,23 (4): 88
[2]杨希国,陈玉燕,李永才等·中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008学术分会论文集, 2009, 264
[3]GB/T 8381·10-2005饲料中磺胺喹噁啉的测定-高效液相色谱法·
[4]GB/T 19542-2007饲料中磺胺类药物的测定-高效液相色谱法·
[5]庞国芳,曹彦忠,张进杰等·分析化学, 2005,33: 1252
[6]农业部1077号公告-1-2008水产品中17种磺胺类及15种喹诺酮类药物残留量的测定液相色谱一串联质谱法·
[7]Stoev G, Michailove A·J ChromatogrA, 2000, 871:37　
[8]Shao B, Dong D, Wu Y N, et al·Anal Chim Acta,2005, 546: 174
[9]吴银良,刘素英,单吉浩等·分析化学, 2005,33: 1713
[10]Malintan N T, Mohd M A·J ChromatogrA, 2006,1127: 154
[11]Balakrishnan V K, TerryK A, Toito J·J ChromatogA, 2006, 1131: 1
[12]HellerD N, NgohlM A, Donoghue D, et al·JChro-matogrB, 2002, 774: 39
[13]Tarsin JA, Carke P SearerG·JChromatogrB, 1999,729: 127
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 小中大

液相色谱-质谱联用技术在体内药物分析中的应用进展

摘要：液相色谱-质谱联用技术体现了色谱和质谱优势的互补，将色谱的高分离性能和质谱鉴别力强的特点相结合，组成了较完善的现代分析技术!较好地适应了现代体内药物分析研究对高精密度和准确度分析方法的需求，进而获得广泛应用。

关键词：液质联用 体内药物分析 进展
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液相色谱—电喷雾串联质谱法及三级质谱法快速定性监测和定量分析赛马尿样中药物

在赛马业中滥用的药物包含种类繁多的化学药物，主要通过取复杂尿样进行分析，使得低浓度下快速、有效、诊断性检测这些药物比较困难。通常，定量分析工作是在三重四极杆质谱上用选择离子反应检测模式进行，但是这种检测方法不能监测到诊断性碎片结构确认方面的信息，需要对其进行衍生化和气相色谱-质谱联用进一步确认。

目 的：
为了建立一种简单、快速、实用性强、能够同时进行定性监测、定量分析的液相色谱-质谱联用方法，我们考察评价赛默飞世尔LTQ线性离子阱质谱仪所提供的可靠定量分析所必须的低检测限、良好重现性、宽线性范围以及同时利用诊断性全扫描二级质谱或者三级质谱进行结构确认等方面的性能。

仪 器：
高效液相
高效液相系统：赛默飞世尔SurveyorTM 液相系统
色 谱 柱：赛默飞世尔 BETASILTM C18柱（2.1mm×100mm，3μm）
质 谱
质 谱：赛默飞世尔LTQ线性离子阱质谱仪
大气压电离源：赛默飞世尔 Ion MaxTM 电喷雾离子源

结 果:
定量分析
根据标准品二级全扫描色谱图中离子信号强度建立标准曲线，表中所有化合物，在不同浓度样品下，进行色谱分离获得的色谱图。

结 论:
在色谱分离检测过程中对共洗脱的药物的正离子负离子检测是通过仪器自动极性切换实现。脱去一分子中性水的药物分子在多频率激化作用下进一步碎片化，从而为确定分子结构提供丰富的诊断性二级质谱图。 化合物酮洛芬经过一个显著的脱去一分子非明确的中性甲酸后，进一步进行三级质谱分析。通过重新调整的离子色谱或者快速获取的多离子反应检测，对全部16个化合物进行定量分析所得到的全扫描多级质谱数据，与三重四极杆选择反应离子检测的定量分析相比，由于赛默飞世尔LTQ线性离子阱质谱仪具有短循环周期的优点，使得实现定量分析所需要的低相对标准偏差成为可能。在非明确中性分子丢失方面，三级质谱实验数据与二级谱图数据相比，不仅能够提供定性定量结果而且能够为确认结构提供诊断性谱图数据。粗略实验结果显示重复进100个尿样，仪器检测灵敏度和重现性没有明显下降。因此，我们证实在赛默飞世尔LTQ二维线性离子阱质谱仪平台上，利用全扫描液相色谱-串联质谱以及三级质谱法发展了一种快速、有效同时定性监测和定量分析马尿样品中药物的方法。
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色谱联用技术在体内药物分析中的应用

肖霞曹 俊凯
（驻马店第一人民医院药剂科，河南驻马店，463000）
【摘要】现在药学的迅速发展促进针对药物及其代谢产物在机体内处置过程的不断深入，一方面对体内药物分析的研究方法和手段提出了越来越高的要求，另一方面也推动了体内药物分析研究方法的蓬勃发。近年来，色谱联用技术的不断发展和完善，在灵敏度和选择性等方面都有了很大的提高，使得对复杂生物样品中药物及其代谢产物的测定变得更加准确，快速和简便，本文就近年来色谱联用技术在体内药物分析中的应用做一简要综述。

【关键词】色谱联用技术；体内；药物；药物分析
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抗生素药物的分析方法研究进展

学生：张丽娜
指导教师： 魏琴 吴丹 李冬梅 夏方诠
摘要 综述抗生素药物的种类，对各种抗生素药物的应用和副作用进行简要介绍。全面介绍抗生素药物的分析测定方法，尤其对测定头孢类抗生素的测定方法进行综合性全面阐述。
关键词 抗生素；分析进展
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 小中大

Generic APIs
产品编号 CAS NO.
Bivalirudin 比伐卢定 128270-60-0
Salcatonin 鲑降钙素 47931-85-1
Ziconotide acetate醋酸齐考诺肽 107452-89-1
Pramlintide Acetate 醋酸普兰林肽 196078-30-5
Eptifibatide Acetate 醋酸埃替非巴肽  
Goserelin Acetate醋酸戈舍瑞林 145781-92-6
PTH (1-34)甲状旁腺素1-34  
Glucagon-like peptide-1胰高血糖素样肽-1 107444-51-9
Triptorelin Acetate醋酸曲普瑞林 57773-63-4
Thymosin α1 Acetate醋酸胸腺肽α1 62304-98-7
Thymopentin胸腺肽 69558-55-0
Terlipressin Acetate醋酸特利加压素 14636-12-5
Teriparatide Acetate醋酸特立帕肽 52232-67-4
Somatostatin Acetate醋酸生长抑素 38916-34-6
Sermorelin Acetate醋酸舍莫瑞林 86168-78-7
Secretin Acetate醋酸胰泌素 17034-35-4
Salcitonin Acetate鲑鱼降钙素 47931-85-1
Oxytocin Acetate 醋酸催产素/缩宫素 50-56-6
Octreotide Acetate醋酸奥曲肽 83150-76-9  
Nesiritide Acetate醋酸奈西立肽 114471-18-0
Melanotan-II Acetate醋酸美拉诺坦II [121062-08-6]
Lysipressin Acetate醋酸赖加压素 50-57-7
Leuprorelin Acetate醋酸亮丙瑞林 53714-56-0
Gonadorelin acetate 醋酸戈那瑞林 71447-49-9
Glucagon Acetate醋酸胰高血糖素 16941-32-5

基本上就这几种的检测
谢谢各位老师的答复
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