用甲醇除蛋白怎么操作

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wtz010[使用道具]
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小中大

我最近要用HPLC检测脑脊液中的谷氨酸和GABA。有文献报道，用高氯酸除蛋白会使谷氨酰胺转化为谷氨酸，从而引起脑脊液中谷氨酸的人为升高。所以我想用甲醇除蛋白，但不知道具体怎么做，而且需要加2倍体积的甲醇，这样的话不是把样品稀释了吗?会不会影响检测?请有经验的朋友指教。谢谢!

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小中大

如果浓度减少一点对检测没影响的话，直接进样就行了，但是HPLC检测一般的程序都要把样品用氮气吹干，然后用溶剂定容，最后再进样检测，这样浓度就不变了。

ttkl533[使用道具]
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小中大

一般用三倍量体积的甲醇进行蛋白沉淀，

假如你觉得浓度会受影响的华，

可以将上清液浓缩富集。

owoo[使用道具]
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小中大

建议选用内标法，

同时考虑药物是否见光易分解，是否热不稳定等因素。

否则，提取出来后量会损失很多。

maomi520[使用道具]
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小中大

用旋转蒸发仪

样品前处理