小中大简单分析一下:
1、虾青素是在400多nm处吸收,为何检测波长选择471nm?选择虾青素的吸收波长,灵敏度不是更高么?
2、流动相(乙腈:水=95:5)。要知道乙腈的洗脱能力很强,这个比例下,保留性不同的物质分离效果不明显,且保留时间很短。
3、2min处的倒峰,是由于流动相或样品中物质的紫外吸收波长<检测波长引起的,也就是说,样品中紫外吸收波长小于471nm的物质,都可能会形成倒峰。
综上,我认为,471nm,乙腈:水=95:5下,样品在2min处洗脱下来,且以倒峰的信号表现出来。
改善方法:
1、选择适合的检测波长。不确定可以先扫紫外。
2、调整流动相中乙腈比例(乙腈比例,慢慢调试),在合适的比例上可选择流动性使用缓冲盐,调pH等,达到分离目的。
3、样品用甲醇溶解,会有溶剂效应,可以改用流动相溶解。