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标题:【求助】细胞状态不好

mybioon[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞状态不好


我养的是成纤维细胞，之前养的好好地，现在细胞也贴壁，但是细胞形状不规则，有的变圆了。我将细胞重悬后还是这样，不知道是怎么了，求各位大侠指导！
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你看看是不是在培养的时候染菌了？造成菌体发生变异了。又或者你培养的菌体就是染菌的其他菌体。又或者会不会是具体退化造成的？
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mybioon[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 mickeylin 于 2015-4-6 16:18 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
你看看是不是在培养的时候染菌了？造成菌体发生变异了。又或者你培养的菌体就是染菌的其他菌体。又或者会不会是具体退化造成的？

应该不是染菌了，培养液不变浑浊，应该没有细菌，也不像染真菌的样子。细胞的数量还是不少的，就不知道传了会不会好些，打算将这些细胞换换瓶，看看状态会不会好些。有人说可能是支原体。
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发表于 2015-4-6 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

养了几代了！ 会不会是老化啦！ 换全新培养基试试！
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mybioon[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 yayya 于 2015-4-6 16:19 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

养了几代了！ 会不会是老化啦！ 换全新培养基试试！

14代，老化后细胞就是这个样子的吗？培养基一直是用的DMEM/F12，20%的血清。培养液基本是3天一换，颜色并不是很黄就换了。
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lagua123[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1961年，Leonard Hayflick利用来自胚胎和成体的成纤维细胞进行体外培养，发现：胚胎的成纤维细胞分裂传代50次后开始衰退和死亡，相反，来自成年组织的成纤维细胞只能培养15～30代就开始死亡。                                             

Hayflick等还发现，动物体细胞在体外可传代的次数，与物种的寿命有关；细胞的分裂能力与个体的年龄有关.

关于细胞增殖能力和寿命是有限的观点。细胞，至少是培养的二倍体细胞，不是不死的，而是有一定的寿命；它们的增殖能力不是无限的，而是有一定的界限，这就是 Hayflick界限。
个人感觉有可能是老化了的，也有可能是血清多了，我怎么总感觉是10%呀
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宁小胡[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养胎儿成纤维，10代以后就不养啦！ 20%的血清是多啦！ 但是肯定没有坏处！ 只是太浪费！ 10%就够了！ 养成纤维你要加点细胞因子，像BFGF等！

细胞老化就扔掉吧！重新复苏吧，最好复苏第2,3代的！
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发表于 2015-4-6 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是呀，传代时间太长了，你想想你每次都消化，吹打，能不形态变嘛，我也出现过这个问题，重新复苏就行。
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mybioon[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 宁小胡 于 2015-4-6 16:20 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我养胎儿成纤维，10代以后就不养啦！ 20%的血清是多啦！ 但是肯定没有坏处！ 只是太浪费！ 10%就够了！ 养成纤维你要加点细胞因子，像BFGF等！

细胞老化就扔掉吧！重新复苏吧，最好复苏第2,3代的！
...

之前有人养到20多代没有问题，细胞的状态还是很好的。现在的细胞不仅状态不好，生长缓慢，换瓶培养也没好转，很是郁闷！
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yyaxw84[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
之前有人养到20多代没有问题，细胞的状态还是很好的。现在的细胞不仅状态不好，生长缓慢，换瓶培养也没好 ...

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细胞传的代数是和你组织来源的动物年龄是有关系的！ 最长都可以养到50代，

可使为了保证实验质量，当然选择的代数越前越好！
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