【求助】人PBMC中的不明物？求鉴定

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标题:【求助】人PBMC中的不明物？求鉴定

remonte[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

人PBMC细胞分离后培养总会出现图中不明物（红色箭头所指的体积较小的东西，大的为细胞）。这是过夜后的状态，48h后会更多。问题头疼了很久，求鉴定到底是什么东西。谢谢了~~~
注：1、培养基为10%胎牛血清的1640,并加有1%的双抗。
2、这种污染只出现在PBMC的培养中，我们实验室中其他种类的细胞培养后无该问题，并且用的是同一种培养基。
2、曾怀疑为阴性杆菌，但无法用血平板等培养基培养出来。庆大霉素抑制无效。

附件

2015-4-6 16:50

Capture2.JPG (25.73 KB)

2015-4-6 16:50

Capture.JPG (76.19 KB)

whitesheep[使用道具]
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发表于 2015-4-6 16:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

估计是支原体，建议扔掉

remonte[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 whitesheep 于 2015-4-6 16:50 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

估计是支原体，建议扔掉

这批扔掉没问题，但新标本还是会长。。。。加什么抗生素能抑制支原体呢？

newway[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

红霉素或阿奇霉素可以抑制支原体，你可以试试
你的培养箱也要擦一下，然后照紫外

JK.jon[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:13 资料个人空间短消息加为好友

小中大

检查培养基有无污染，如没有，估计是细胞碎片，你在纯化PBMC中是否裂解过红细胞等等

kulee[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可能是细胞碎片吧。。。。

cj_mondy[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

支原体在普通光学显微镜下不染色是看不到的，太小了，这肯定不是支原体。
你分PBMC技术过关吗？不是碎片就是其他细胞

remonte[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 cj_mondy 于 2015-4-6 17:14 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

支原体在普通光学显微镜下不染色是看不到的，太小了，这肯定不是支原体。
你分PBMC技术过关吗？不是碎片就是其他细胞

技术应该没有问题，因为以前实验室培养PBMC也没见过这个东西。今年才出现的。
细胞碎片不会生长的吧？但这个东西48h或72h后会长满视野的，细胞状态会很差。。。。。

remonte[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 JK.jon 于 2015-4-6 17:13 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

检查培养基有无污染，如没有，估计是细胞碎片，你在纯化PBMC中是否裂解过红细胞等等

没有裂解过。
应该不会是细胞碎片吧，48h或者72h后会更多。会生长的。细胞状态也很差。

babybabe[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

拿给你身边的老师鉴定一下，看到实物可能有助于分析
，污染的面大

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