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标题:【求助】PK15细胞培养

ujne[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】PK15细胞培养

本人最近要培养PK15细胞，我没有接触过着方面的实验，请各位高手在仪器，步骤，注意事项等方面给予指导，不胜感激。
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veiwu[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得你还是先看看细胞培养这本书先吧。了解细胞培养大概用到那些一起和实验条件，然后再有针对性的了解该细胞的特点，选择优化的方案进行培养。不要偷懒！！！祝成功
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yizhi[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

MEM+10%新生牛血清+双抗，注意消化时间，长满就传，每次传代最好记个数，积累经验。
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ujne[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢，再请教一下，我现在养的PK15细胞生长速度很快，1:5传一天几乎都长满了，吹打的时候细胞团块比较多，是啥原因？
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yizhi[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 ujne 于 2015-4-6 17:47 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
谢谢，再请教一下，我现在养的PK15细胞生长速度很快，1:5传一天几乎都长满了，吹打的时候细胞团块比较多，是啥原因？

本来就长得快啊，你传的时候记下数，少传点，我们是两天一传的。当然一定要吹打开，使劲吹是没有问题的，不能成团。
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ns5fan[使用道具]
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发表于 2015-4-6 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

成团的原因跟消化有很大的关系，消化这一步是很关键的，加入胰酶后观察到细胞分散成单个细胞的时候就该倒掉胰酶，留残夜继续消化，然后等到有少量细胞成流沙状流下来时是最好的吹打时间，没消化好使劲吹打始终会对细胞产生机械损伤，次数多了以后细胞始终会受影响
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