小中大经常听人谈到碎片的问题,其实这个问题产生个人觉得有几个因素:
1、消化不当造成的(贴壁细胞)
2、细胞状态不好造成的(死亡细胞的碎片)
3、污染造成的。很多人怀疑支原体,如果细胞来源正规,现在都用一次性的器皿,支原体污染没有想像的那么严重。如果怀疑是支原体,有一个简单的方法判断一下,排除传代操作不当外,细胞传代几次以后,细胞生长缓慢,培养基一般不混浊变色。此外,本人还遇到过另外的污染情况也能造成碎片增多,开始时,碎片增多,培养基颜色变化不明显,继续培养,你会发现碎片急速增多,培养基变黄,混浊。
对于你的样品,个人有一下建议:
图片显示你的细胞要么时半贴壁的细胞,要么时悬浮细胞,请确保传代操作没有问题。(如果是半贴壁细胞,建议不要过渡,是否有其他机械损伤)
如果是半贴壁细胞,轻轻振荡培养皿,换液再培养;如果是悬浮细胞,离心换液培养。观察培养基是否变色混浊
有条件做一个支原体染色。对于黑胶虫,我印象是这个东西一直有争议的,正规培养基一般不大会出现这个东西的,实在不放心,你可以用血清做一个对比试验。