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标题:【求助】细胞贴壁为什么越来越紧

mamamiya[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞贴壁为什么越来越紧

我养的CNE2细胞从肿瘤医院拿回来的时候，状态还是很不错的，而且肿瘤医院那边只消化3分钟，可是拿回我们这边培养却要消化20分钟左右才能把细胞吹下来，这么是怎么回事呢？现在细胞状态也开始不好了，忧愁啊
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S6044[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
遇到同样问题！求解，而且消化后养起的状态不如以前！
拜求！~~
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xevin[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是消化酶出了问题？
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发表于 2015-4-7 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

在医院和在细胞间用的胰酶浓度一样么？ 消化时间过长对细胞状态影响很大，建议提高胰酶浓度（0.05%---0.25%），缩短消化时间（期间可以从侧面轻拍dish，加速细胞脱落）
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xingyi08[使用道具]
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 小中大
如果酶没有问题，是不是换了培养基，考虑培养基里的贴壁因子。
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summerxx[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果排除培养基、血清、环境等其他因素的影响，这可能是消化时间过长引起的，胰酶的质量不好导致消化时间不太均一，先消化下来的细胞受到胰酶刺激时间过长导致以后出现各种问题，不贴壁、贴壁形态也不太行~~
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qhyu[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养MCF-7细胞液出现过，而且冻存之后再复苏的状态也不好，长的很慢！
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chengjie79[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
本人观点：消化时，培养基没有吸干，从而抑制胰蛋白酶活性，从而延长消化时间，导致细胞消化过度，自然细胞消化起来后继续培养就容易死亡。我上次给别人的MCF7，他们也遇到这样的问题。
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abc816[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知道你的消化之前有没有用PBS洗过细胞没有，若洗过的话，就是你的TE有问题了，重新配把，细胞随着传代的次数增加一般会贴壁越来越不牢固。。。估计是TE有问题了啊
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2015-4-7 15:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是不是消化酶出了问题

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胰酶和医院一样的呀，就是我用的是培养皿，医院用的是瓶子，不知道这个有没有关系
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