液质联用

蛋白质磷酸化是一种很重要的修饰,但是质谱很难检测到.

大家根据自己的经验一起来分析讨论一下,磷酸化肽难检测的原因和解决的办法??

关于磷酸化的话题是一个经典而新颖的难题，蛋白质磷酸化是蛋白质翻译后修饰研究的焦点之一，是生物体系功能转换的“分子开关”，如酶活性调节、信号传导及亚细胞定位等等。磷酸化主要包括四类：1）O-phosphates (Ser, Thr and Tyr); 2) N-phosphates (Arg, Lys and His); 3) acylphosphates (Asp and Glu); 4) S-phosphates (Cys).
目前研究得比较多的，主要是1）类磷酸化，方法也相对比较成熟（详细的思路及具体方法待续）。

我只知道，磷酸化的肽不稳定，浓度又低。所以很难检测。但还必须检测。

现在研究的比较多的确实是O-phosphates (Ser, Thr and Tyr),是个热点.
难点:1.本身磷酸化蛋白的丰度很低
     2.由于其带了负电荷,在质谱正电荷的模式下很难离子化

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