细胞世界

PCR技术的原理表明PCR技术不能直接扩增RNA，很多资料上都可以看到这句话。我在想RNA不能直接被扩增的原因是什么呢?高温(变性时)易降解?RNA合成可以不需要引物因此容易产生非特异性产物?DNA聚合酶的原因?

在一步法反转录PCR中以基因特异性引物反转录合成cDNA，然后再进行PCR扩增。在一步法中，为什么一定要先进行反转录?按理，用RNA作模板我想是可以用DNA聚合酶扩增合成DNA的。但是这方面的报道很少，采用的人也很少。为什么一定要将反转录和PCR扩增结合起来才能扩增RNA模板?

请大家发表各自的看法!

DNA耐碱而RNA易被减水解，而PCR反应体系似乎就是偏减的，这种情况模板不稳定如何扩增呢。

RNA可以直接做PCR的，也就是RNA-PCR法，不过局限性很大。我只知道个大概，因为不做这个，了解也不多。新手还是从经典的rt-pcr做起比较好。