用了高保真酶如何在PCR产物后加A ? 连在T载体上 - 分析百问 - 分析测试百科

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标题:[未解决]用了高保真酶如何在PCR产物后加A ? 连在T载体上

[未解决]本主题悬赏可用分 10

ouoje[使用道具]
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发表于 2009-1-20 12:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用了高保真酶如何在PCR产物后加A ? 连在T载体上

我用了不再不在PCR产物后加A 的Pfu 高保真酶我该怎么让他加上A ? 让他连在T 载体上啊? 在这里先谢谢大家

michael_b_rex[使用道具]
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发表于 2009-1-21 23:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

很简单的，只要在最后72度延伸的时候拿出来再加个普通的Taq酶(我用过50微升体系只需加1个单位的普通Taq酶即可)，然后延伸个10min就可以加上A了。

NVIDIA[使用道具]
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发表于 2009-1-22 22:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

将产物纯化后，加dATP和普通 Taq酶，然后延伸个10min就可以了

iTIANMING[使用道具]
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发表于 2009-1-23 21:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

加个垃圾酶温浴一下，很方便的!

雪上飞狐[使用道具]
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发表于 2009-7-24 14:36 资料个人空间短消息加为好友

好像某些高保真酶产生的末端就是带A的。若用其他高保真酶，则可以将产物纯化后，加dATP和普通 Taq酶，然后延伸个10min就可以了

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miracle 2009-7-24 15:00 专家分 +2 谢谢您的热心应助！