液质联用

目标化合物：有机酸和有机碱反应所得的产物，为一酯类化合物，但不溶于醇、水溶液等极性溶剂，可溶于环己烷、氯仿等非极性溶剂
目的：用LC-MS定性检测反应产物，欲知反应产物有否含有目标化合物，反应体系媒介为环己烷
问题：LC-MS定性测定，直接用注射器手动进样，那么用何种溶剂作为流动相带动样品（反应产物）进入质谱好呢？用甲醇、异丙醇（目标化合物不溶于醇）可行吗？还是要用环己烷等非极性溶剂好？

ps:由于本人只用过水、甲醇、乙腈、异丙醇极性溶剂作为流动相，其他非极性溶剂未曾尝试过，不知对质谱有没有什么不良影响，所以问问各位意见！

谢谢！

[ 本帖最后由 haoranjob 于 2009-2-12 19:40 编辑 ]

如果可以选择的话，用GC-MS分析比较合适吧。
非要用LC-MS的话，我觉得楼主应该考虑使用正相色谱柱来分析，否则在反相系统中很可能会析出。但是离子源用ESI APCI不太合适，可以试试APPI源，适合于分析非极性化合物。
另外，想问楼主，异丙醇和水能作为反相柱的流动相吗，你是在分析哪种类型的化合物用到异丙醇的，多谢！

有机合成反应监测，反应液不建议直接进质谱分析。通常反应体系都比较脏，容易污染离子源。我这边化合物纯度合要求才FIA分析（通常纯度在90%以上）。

确实，反应监测，很多时候会遇到目标化合物在流动相体系溶液溶解度小的情况。在这种情况下，具体情况具体分析吧。

楼主是环己烷体系，可以取少量反应液（2-3滴），然后用甲醇稀释，只要透明澄清，就没问题。质谱的灵敏度很高滴！遇到什么都难溶的化合物，我这边会尝试添加DMSO、DMF、吡啶，向体系里加点酸（甲酸、乙酸）、碱（氨水、三乙胺）调节pH值等方法来辅助溶解，只要用少量能溶（滤过固体颗粒、乳化液），照常LC-MS分析。很多时候我们都这么做，同时，对于质谱日常维护而言，我们也定期清洗离子源。

如2楼所言，若已知目标化合物极性小且具有一定挥发性的话，可以考虑用GC-MS来测。

非常感谢您的建议！

因为没有GC-MS，所以非LC-MS不可了，而且只有ESI和APCI可供选择。
很抱歉，可能问题用词有点不够准确，我只是想选择一种合适的溶剂带动样品进入质谱，因为这种进样方式是手动注射进样，用注射器吸取样品后，打入连接六通阀定量环，再通过转换阀使流动溶剂（即我说所谓的流动相，其实不能这样叫）带动注射入定量环的样品进入质谱检测分析，其实是不用过柱子的，溶剂从瓶子直接连接进入质谱，只起到带动样品的作用，即没有固定相，所以也无所谓这个溶剂是流动相了！我之前所用到的异丙醇-水，也是在这种情况下用的，并不是经过反相柱子进行实验！

非常感谢您的建议！

因为反应所得的目标化合物是未知的新化合物，没有物理性质数据可供参考，而且产物还有可能含有大量反应物，分离纯化困难，所以没法确定目标物的纯度（如果知道其纯度有90%以上就不做MS，直接去打核磁了），而且现在就是想知道反应产物里面究竟有没有该目标化合物，大概含量有多少，即粗略估算一下得率，若得率高的说明反应条件可行，就拿去打核磁、红外作进一步分析了！

已经尝试过把样品滴到甲醇里，有出现白色浑浊！请问您的意思是说往带动溶剂里面加DMSO、DMF、吡啶、酸（甲酸、乙酸）、碱（氨水、三乙胺）等吗？

"经尝试过把样品滴到甲醇里，有出现白色浑浊！"
用0.45微米微孔滤膜,滤过,取清液,进质谱分析.试试看如何?

"遇到什么都难溶的化合物，我这边会尝试添加DMSO、DMF、吡啶，向体系里加点酸（甲酸、乙酸）、碱（氨水、三乙胺）调节pH值等方法来辅助溶解，只要用少量能溶（滤过固体颗粒、乳化液），照常LC-MS分析。"

"请问您的意思是说往带动溶剂里面加DMSO、DMF、吡啶、酸（甲酸、乙酸）、碱（氨水、三乙胺）等吗？"

不是啊! 是指配样啊,配样的时候, 根据具体情况往样品溶液里面滴加DMSO、DMF、吡啶，酸（甲酸、乙酸

）、碱（氨水、三乙胺）等.
比如,你现在的情况是 "把样品滴到甲醇里，有出现白色浑浊！",这样的话,可以考虑往样品溶液里面添加

些助溶剂(DMSO、DMF、吡啶，酸（甲酸、乙酸）、碱（氨水、三乙胺）等,根据实际情况去尝试!).

楼主为什么非得做直接进样呢?很容易发生离子抑制现象的.做个LC-MS,不是更好吗?短柱,也就5min左右.

[ 本帖最后由 aa_tang 于 2009-2-14 12:47 编辑 ]

我晕~看来还是我的表述不够清吧……谢谢您！

样品是没问题的，本来是澄清的，本来就尝试过直接进样，那没什么必要加其他溶剂的，我要的是一个带动样品进去的合适的溶剂（即通常作为流动相方式的溶剂），而且这个溶剂要跟样品溶液互溶的，现在就是因为样品的成分不溶于醇（所以用甲醇、异丙醇等极性溶剂就不是很好），因此就想看看改用什么溶剂比较合适，非极性溶剂（比如烷烃类）等可以吗？那想先请教一下能作为流动相进质谱的非极性溶剂有那些呢？（是要有实践经验用过的）

我说的不就是LC-MS嘛，也是通过液相部分带动样品进质谱的，只是不接柱子，用一个两通代替，只是不用自动进样，用手动注射而已阿，我所要问的溶剂不就是相当于一般做LC-MS时的流动相喽~~

明白楼主的意思了，这种情况工作中遇到过，说说自己的做法吧：HPLC部分走单泵——100%MeOH or 100%CH3CN将样品带入质谱，而样品溶液呢，比如楼主的环己烷反应液，可以将把样品滴到氯仿（或者四氢呋喃、环氧六烷，若可溶的话）里，然后用甲醇稀释这个混合液（样品2-3滴，甲醇与氯仿能任何比例互溶，不会析出）做成进样用的样品溶液。这样就不用担心发生遇到流动相会乳化析出之类的问题了。（RP-HPLC流动相体系通常都是甲醇-水、乙腈-水、甲醇-乙腈-水、或者甲醇-乙腈-水含少量四氢呋喃）

[ 本帖最后由 aa_tang 于 2009-2-14 17:57 编辑 ]

谢谢您的建议！

这尚可是一个可行的办法，可以避免样品和流动相混合后乳化或析出，但样品给稀释了很多，目标化合物不知还能不能比较明显地检测出来……

我会先试试看吧，希望结果会理想一点，再次感谢您，跟我讨论了那么久！Thank you very much！

能把你的实验结果跟大家分享一下吗