手性分析

想分析我的2-丁醇是R还是S形的，想用HPLC（UV）检测，请问用什么柱子和流动相 啊？用过正相、反相都测过，用苯甲酰氯衍生也做过，都不行，用过AS,AD,OD等柱子，都不行！
苯甲酰氯衍生后，苯甲酰氯衍生后没有反应完全，所以有苯甲酰氯残留，出峰总是和苯甲酰氯很靠近，就是分不开！请大家帮忙啊！·

呵呵，2-Butanol 虽然简单，却是个“明星手性分子”，没想到有这么多人在做啊？！

苯甲酰氯衍生，然后用AD柱分析，这个方法是肯定可行滴！只不过，在手性分析之前得拿到比较纯的苯甲酸二级丁酯（衍生产物），即把过剩的苯甲酰氯原料除去。

偶这边是这么操作的：衍生后，将产物放入冷稀NaOH溶液中搅拌，使过剩的苯甲酰氯分解生成极易溶于水的苯甲酸钠，然后用乙酸乙酯抽提出衍生产物（苯甲酸二级丁酯）。这样，拉干溶剂，再用乙醇或者异丙醇复溶，AD柱手性分析！没有问题的，可以基线分离！

更简单的前处理方法：直接用冷稀NaOH溶液洗涤衍生产物，再干燥除去残留水分，就可以用乙醇或者异丙醇复溶进行手性分析。

说说自己的土办法，登不了大雅之堂，却很简便快捷。呵呵。。。

先取一只EP管，往里面加几滴2-丁醇，然后再加入几滴苯甲酰氯（让苯甲酰氯过量），再加入些氯仿作为反应溶剂（总体积在1ml左右），就这么一混，摇匀，40摄氏度水浴将近半个小时就可以啦。再往EP管中，加入冷稀NaOH溶液约1ml，振摇，静置分层，分出氯仿层，挥干氯仿，乙醇复溶，手性分析。

让大家见笑啦，不过，这个方法操作简单，自己感觉方便实用！

用了正己烷：乙醇=90：10
1.0ml/min
没有分开
请指教！

“没有分开”，能否把分离的具体情况讲更详细些？比如，在“正己烷：乙醇=90：10   1.0ml/min”的条件下，保留时间多少？出峰偏早还是偏晚、有没有分离的迹象（有两个分叉峰，或者有肩峰，只是没有基线分离而已）还是就很漂亮的一个单峰？还有，是用消旋体做的吗？手性分析前，柱子得充分平衡好啊（手性柱平衡很慢，得花2-3个小时。。。）

楼主可以根据自己的具体条件，再调整一下流动相，
试用 正己烷：乙醇=95：5  1.0ml/min，看分离情况如何？若不理想，可以考虑改用正己烷：异丙醇二元体系。再摸索一下吧。（或者往流动相体系添加改性剂，在用纯正己烷-乙醇、正己烷-异丙醇体系不可行的情况下）
ps：用AD-H柱，正己烷-异丙醇体系是能够基线分离的。AD柱与AD-H柱的适用范围相同啊，只是AD-H柱对某些化合物分离效果更好而已啊。

正己烷：乙醇=90：10   1.0ml/min”的条件下，保留时间5min,  出峰偏早, 没有分离的迹象,还是就很漂亮的一个单峰。 乙醇里我放了三乙胺后，也没分出来，还是就很漂亮的一个单峰。正己烷：乙醇=95：5  也试了，结果还是不好。请指教！

用 正己烷-异丙醇=95:5  1.0ml/min ，更换条件后，至少平衡柱子2h，然后再分析。手性柱平衡很慢滴说。。。

回复 #6 yang790730 的帖子
用 正己烷：异丙醇=95:5  1.0ml/min ，更换条件后，平衡柱子了，还是没有分开。保留时间7.9min,  出峰偏早, 没有分离的迹象,还是就很漂亮的一个单峰。 异丙醇里我放了醋酸后，也没分出来，还是就很漂亮的一个单峰。结果还是不好。请指教！

晕倒，居然还是不行。。。，对于苯甲酸二级丁酯的手性分离，难道AD 与AD-H差别有这么大吗？
只能再试其他条件了，楼主可以再尝试 正己烷:异丙醇=99:1  1.0 ml/min （可以事先按体积比配好流动相，然后走单泵），试试看吧？！
楼主有Chiralcel OD-RH column吗？尝试用反相模式去做一下？
偶也想不到其他的招了，用chiral HPLC来做的话。。。。

谢谢
Chiralcel OD-RH column 的填料是什么呢？
AD 与AD-H在什么方面有差别？
谢谢