【讨论帖】microRNA内参，u6,u6a,u6b，到底如何选择

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标题:【讨论帖】microRNA内参，u6,u6a,u6b，到底如何选择

园丁##[使用道具]
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发表于 2015-6-1 15:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的做法是先逆转录再荧光定量pcr！
逆转录使用特异性引物（u6的反向引物）。
u6，also as know RNU6A,RNU6B，分别对应 RNU6-1，RNU6-2，
U6 F CTCGCTTCGGCAGCACA
U6 R AACGCTTCACGAATTTGCGT
这个引物是在google学术搜索里面检索出来文献最多的，有多篇cancer reserach高影响因子使用，且经丁香园内朋友使用，反应很好！
在生工合成的，今天pcr结果非常好！U6的ct 13.1左右。
另外，多谢园友提醒，这些u6都是用于人的。不清楚，也没有验证是否可以用于老鼠！
希望能够给大家一点帮助。

园丁##[使用道具]
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发表于 2015-6-1 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

后记：U6 F CTCGCTTCGGCAGCACAU6 R AACGCTTCACGAATTTGCGT这个引物是在google学术搜索里面检索出来文献最多的，有多篇cancer reserach高影响因子使用，所以在没有人回答的情况下，选择了这个。在生工合成的，今天pcr结果非常好！U6的ct 13.1左右。不知道别的U6引物实验结果怎么样，但是我可以证明，这个用着很好！希望能够给大家一点帮助。对你有帮助的话，请投票支持！

园丁##[使用道具]
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发表于 2015-6-1 15:08 资料个人空间短消息加为好友

小中大

U6 F CTCGCTTCGGCAGCACA
U6 R AACGCTTCACGAATTTGCGT
这个引物是在google学术搜索里面检索出来文献最多的，有多篇cancer reserach高影响因子使用，所以在没有人回答的情况下，选择了这个。
在生工合成的，今天pcr结果非常好！U6的ct 13.1左右。
不知道别的U6引物实验结果怎么样，但是我可以证明，这个用着很好！
希望能够给大家一点帮助。

JK.jon[使用道具]
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发表于 2015-6-1 15:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我刚开始做micro-rna，也不知用什么引物？本来打算直接买U6的试剂盒，可是挺贵的，
谢谢楼主的提供，先合成试试.谢谢了，那请问楼主是用的TAKARA的RT-PCR试剂盒吗？
谢谢了，急需！

S6044[使用道具]
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发表于 2015-6-1 15:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请问一下楼主：你的U6是人的还是什么物种的？包括了探针序列吗？

chengjie79[使用道具]
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