液质联用

想要检测某物质中的总脂肪酸和游离脂肪酸，查了一系列文献后，觉得总脂肪酸可以通过皂化，甲脂化，GC-MS检测得到；但是对于游离脂肪酸的提取和衍生化，大多数文献都是有机溶剂直接提取后，然后甲脂化，再用GC-MS检测。个人认为在甲脂化的过程中，甘油三酯、二酯、一酯（TAG DAG MAG）会不同程度的解离出游离脂肪酸，这样实验结果的重现性会比较差，而且与实验目的不符；另外，三甲基硅烷化试剂倒是可以只对游离脂肪酸进行衍生化，但是价格比较昂贵。

哪位专家有这方面的经验，请不吝赐教！多谢！

[ 本帖最后由 yf197854 于 2009-2-17 15:20 编辑 ]

确实，TMSCl甲酯化游离脂肪酸，很方便滴，价格嘛。。。方便的代价吧，O(∩_∩)O~

皂化又不适合，那么楼主有尝试过  酸催化 or 碱催化的脂肪酸甲酯化吗? 可以试试硫酸-甲醇甲酯化法——用甲醇-甲苯-硫酸（体积比为20:10:1）在沸水水浴条件下进行衍生化，看是否可行？试试吧。

感谢an_tang的帮助。我以前用过酸甲脂化和碱甲脂化方法，但是这样的方法一样不可避免的会水解TAG，所以还是不能得到游离脂肪酸的真正含量。

嗯，确实会存在这个问题。检测出来的结果不能反映真实情况。若毛细管柱可以选择的话，不衍生直接测 free acid 也可以的，有专门用来分析游离酸的毛细管柱。（自己曾用Stabilwax DA毛细管柱分析过游离酸，不过柱子当时是客户指定的且由对方提供）这样下来的话，花费更高了，也不划算。实在不行的话，就用硅烷化方法吧。

你可以用BLUE GENE 的试剂盒做啊，非常方便的，中间会用到酶标仪，试剂盒也就是两千多元