做液相色谱时，如果用梯度洗脱时是不是基线会上升？

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标题:[未解决]做液相色谱时，如果用梯度洗脱时是不是基线会上升？

[未解决]本主题悬赏可用分 10

zhaohaimi[使用道具]
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发表于 2011-6-2 15:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教各位坛友，在做液相色谱时，如果用梯度洗脱时是不是基线会上升，感觉整个图是斜的？
我如果不用梯度的话，后面会有一点拖尾，怎么处理啊？
新手求助！

猴子[使用道具]
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发表于 2011-6-2 17:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

回复 #1 zhaohaimi 的帖子

用的什么检测器？正相反相？梯度之所以会漂是因为两种溶剂对检测器的响应不一样，可以选其他溶剂配对啊，或者用其他对溶剂不敏感的检测器啊！选好条件基线漂移低于主峰响应的1%是很容易做到的！

用等度拖尾，可以调一下流动相pH：待测物是酸，流动相就加0.1%甲酸；碱，就加0.01%的氨水试试！
实在不行还可以加点三乙胺类的扫尾剂试试。

notrjhn[使用道具]
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发表于 2011-6-3 11:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

梯度不是为了抑制拖尾的，梯度是为了提高分离度，抑制拖尾的方法是加算活着缓冲盐。

aasle[使用道具]
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发表于 2011-6-3 13:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

走梯度时，基线是不怎么平，只是不是太斜就行，除了这个问题，走梯度还容易出现鬼峰

haohaorenjia[使用道具]
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发表于 2011-6-3 13:52 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果分离多个组分可以选择梯度洗脱，基线斜是因为流动相B比A的吸收大，这时候可以在A中添加少量的B。

zhaohaimi[使用道具]
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发表于 2011-6-3 14:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

那一般应该加什么盐啊？

ttkl533[使用道具]
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发表于 2011-6-3 17:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 zhaohaimi 于 2011-6-3 14:51 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
那一般应该加什么盐啊？

三乙胺
看你具体的情况，梯度基线是会波动。调节你下比例变化的时间。只是有点斜的话好解决。

baohailin[使用道具]
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发表于 2011-6-3 17:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我发现我的峰有点胖，15.2的峰高，0.26的峰宽，这正常吗？
还有就是想请教下，我用外标法做标准曲线，峰面积最好用手动积分还是自动积分啊？
如果自动的话好像把拖尾的那部分也会算在内！

ttkl533[使用道具]
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发表于 2011-6-5 11:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 baohailin 于 2011-6-3 17:06 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我发现我的峰有点胖，15.2的峰高，0.26的峰宽，这正常吗？
还有就是想请教下，我用外标法做标准曲线，峰面积最好用手动积分还是自动积分啊？
如果自动的话好像把拖尾的那部分也会算在内！ ...

柱压、出峰时间是多少？可以再提高流速，提高一点柱温试试（一定要在柱子的耐受范围内）。看看峰形有没有改善。样品对pH敏感吗？也可以调节pH试试。
外标做曲线最好还是自动积分。手动积分的话人为变动误差太大。

BridgetJones[使用道具]
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发表于 2011-6-5 11:05 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们加的是磷酸二氢钾和磷酸氢二钾，主要调节PH.

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