液相色谱

昨天按照外文文献上的方法提取了番茄果实中的类胡萝卜素，用C18的色谱柱跑液相，没出峰，该柱子是Agela Venusil MP C18的，4.6mm*250mm，填充物是硅胶，之前我们实验室有人用它测叶黄素，跑的标样和样品还行，到了我就不出峰了，一直老是基线状态，我用的流动相是甲醇和水，用乙酸乙酯回溶的样品，不知道是不是流动相不对，请教各位大侠！
另外，我刚开始接触，不大懂，我想知道测类胡萝卜素除了用C30的专用柱，如果用C18的应该选什么填充物的，流动相用什么？如果有哪位高手测过，还望不吝赐教方法!万分感谢！ MTBE可以做C18柱子的流动相吗？

用的流动性洗脱能力不够吧，还是检测器波长没选好？
不知道条件流动相就先用纯甲醇，根据保留情况再加水调。波长选择根据紫外光谱来，找最大吸收峰处的波长。

乙酸乙酯的截止波长蛮大的，能不能用其他溶剂代替？
或者挥发干乙酸乙酯再用其他溶剂溶解胡萝卜素
这个具体没测过，纯属参考哈哈

可能是色谱峰出峰太晚，结果摊平了。也可能是你采集的时间短了，
试一下直接用甲醇洗脱，将样品的采集时间延长到1小时。胡萝卜类其保留时间较长。

应该是没有出来。

  你提个问题就说清楚啊？甲醇与水的比例是多少？

  甲醇少了跑不出来的。有时纯甲醇都跑不出来，就要考虑用乙腈了。

  你自己先好好把理论研究清楚再来做啊，总不能往那仪器前一站，找篇参考文献当手纸一样，就开始做液相啊，那是纯农民啊。

我也怀疑是流动相的问题，可能色素在柱子上的吸附能力太强，没洗脱下来，准备换流动相重新再摸索条件。

截止波长是什么意思，是说它的吸收范围很广吗，我最后就是用乙酸乙酯回溶的呢，我看到有不少文献上都用这个，我刚开始接触，也没有基础，所以就参考别人的方法摸索，还是谢谢你！

我一开始也以为是时间不够呢，参考别人的保留时间，我觉得设的时间应该是足够的，我设了一个小时呢，估计还是流动相的问题，还有待于摸索，谢谢！

虽然你的建议有点参考价值，但是你后面说的那些话让人很不爽，既然帮人就好好说吗，别费力不讨好！