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标题:[未解决]关于液相色谱柱反冲的问题（已咨询售后）

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
a50044758[使用道具]
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发表于 2011-6-14 13:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

关于液相色谱柱反冲的问题（已咨询售后）

关于色谱柱能不能反冲的问题争议很大，一直困扰了我很久，我新定的安捷伦TC-C18（2），粒径是5um，色谱柱在一次使用后压力上升了50bar，以前用纯甲醇冲的时候压力只有68bar，现在用纯甲醇冲，压力达到了128bar，而用95%水+5%甲醇冲是压力更达到了170bar。
      于是我电话咨询了安捷伦的售后，别人给我的建议是将色谱柱用纯甲醇，乙腈，异丙醇依次低流速反冲，我问她反冲对柱子的影响会不会很大，她保证说反冲是没有任何影响的。
      对于色谱柱反冲的问题，大家有什么看法啊？
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发表于 2011-6-14 14:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
低流速反冲没有问题，我们经常这样处理。
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发表于 2011-6-14 14:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
反冲不是万万不能，实在没办法时反冲一下有可能会有意想不到的结果。
换句话说反冲柱子是死马当活马医。
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a50044758[使用道具]
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发表于 2011-6-14 14:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #3 aasle 的帖子

死马当活马医？我的柱子还没到死的地步吧，跑流动相的时候压力是168bar左右，我就是不想它的压力一直升高才考虑是否反冲的。你的意思是不要反冲，等柱子压力升高到不能用的时候再反冲吗？
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aasle[使用道具]
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发表于 2011-6-14 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #4 a50044758 的帖子

是，这种情况你可以考虑梯度冲洗。柱压升高有可能是里面有东西没有冲出来。先用大比例水90%~95%，冲一会在过渡80%20%过渡一下最后再用纯乙腈冲1~2个小时看不看有没有效果。

还是不行可以低流速反冲一下（流速一定要低最好不超过0.3）。反冲的效果也不一定明显。最好就是做好预防，装个保护柱。
不能反冲的原因是反冲有可能造成色谱柱内填充物料发生移动，对柱子产生损害。所以一定要低流速冲。
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发表于 2011-6-14 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
看看能不能拆下柱头，里面如果有过滤片最好了，拿下来用异丙醇超声清洗
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发表于 2011-6-14 15:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
柱子小流速反冲是没有问题的。但是对你的降压有没有效果，还要看你选的流动相。既然只用一次，那就对症下药，用对那个阳平溶解度大的溶剂冲洗。。
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发表于 2011-6-14 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
说的不能反冲是指不能反复经常变换着方向冲，偶尔一次应该没事
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发表于 2011-6-14 17:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可以先以甲醇，乙腈或30%异丙醇-水来正向冲洗，将柱子中的填料彻底清洗活化。反冲色谱柱不建议你使用，因为会把柱子中的填料冲散，填料断面也会不平整，造成你日后使用柱效降低或峰型异常。
可以尝试梯度洗脱一下，看看能否将柱子中的一些杂质冲出来。
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发表于 2011-6-14 17:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 QQ

 小中大


QUOTE:
原帖由 a50044758 于 2011-6-14 13:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
关于色谱柱能不能反冲的问题争议很大，一直困扰了我很久，我新定的安捷伦TC-C18（2），粒径是5um，色谱柱在一次使用后压力上升了50bar，以前用纯甲醇冲的时候压力只有68bar，现在用纯甲醇冲，压力达到了128bar，而用95%水+5%甲醇冲是压力 ...

据我所知，安捷伦XDB  SB等系列的液相色谱柱可以反冲，而且可以反向使用，柱效和正向用没有什么区别的，安捷伦耗材应用工程师也证实过反向使用是可以的。
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