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标题:【求助】多聚赖氨酸包被培养板

龙小好汉[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】多聚赖氨酸包被培养板


请问：
多聚赖氨酸包被培养板和培养瓶时，该注意什么问题？
我的方法是：浓度为50ng/1ml的多聚赖氨酸，加入培养板或培养瓶能均匀覆盖底部就可，放置在无菌操作台中过夜。第二天早上用时先用双蒸水冲洗三遍再用。
我的问题是多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？
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youyou99[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我曾用过多聚赖氨酸包被培养瓶,但浓度是0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,当然要紫外消一下.我觉得时间长点没什么大碍.但不知道你的细胞是什么,是不是娇气的那种?也不知道我的方法对不对,大家多指点一下吧.谢谢了先!
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龙小好汉[使用道具]
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 小中大
相关疾病：
先天性卵巢发育不全综合征
我养的是海马神经元，算是比较娇气的一种细胞，我们这里的老师说，多聚赖氨酸不能用紫外线照射。请问大家配置的多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久？
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jkobn[使用道具]
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 小中大

1,用赖氨酸包被培养板和培养瓶时，应该选用多聚左旋赖氨酸(分子量为15-30万) ；
2，感觉你“浓度为50ng/1ml”有些低，我一般最后多聚赖氨酸使用浓度达到20－30ug/ml；
3，包被时间一般为6－7h，或者过夜也可；
4，使用时应该先用灭菌水洗三次＋PBS（起平衡盐作用）洗一次，洗液的量应该大于包被液的量；
5，“多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？”，我包被时间最长的经历 有过48h,最后只是多聚赖氨酸随着时间延长蒸发一些而量变少了，但是对细胞生长并无大碍，这是我曾经有过的经历，所以我会负责地告诉你；
6，“多聚赖氨酸能在4度冰箱里放多久？”，最好置于－20度保存，放置数月乃至半年都可以；
祝你们实验顺利
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ldh[使用道具]
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 小中大

我直接用博士德分装的SIGMA 10ml包装的Poly-L-Lysine，没写浓度，请问这个浓度是多大的呢？要稀释多少倍???(通常用来做免疫组化封片的）,谢谢。
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rfv[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我问过博士的公司，他们分装的多聚赖氨酸是用来作免疫组化的，没有做过细胞培养实验，他们不保证能否用在细胞培养中，建议你买其他公司的吧，有固体的，分子量为15-30万，我们实验室用浓度0.01%的来促进神经细胞贴壁
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龙小好汉[使用道具]
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 小中大
实在对不起，我的多聚赖氨酸的浓度是50ug/ml，因为笔误把单位搞错了，请各位多包涵啦！谢谢你的回答！
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xue258[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们用的多聚赖氨酸浓度为100ug/ml,一般包被3-4小时即可用.我们包被完后一般放在培养箱里,临用时拿出来洗三次，吹干即可．如果不急着用，放在培养箱里较长时间也没关系，把瓶盖拧紧即可，我最长放了２星期也没有问题．
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xue258[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们的多聚赖氨酸一般可反复用５－６次．
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quiqui008[使用道具]
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发表于 2015-6-9 18:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

左旋和右旋的多聚赖氨酸都可以用于包被细胞培养器具,主要看你的细胞贴壁能力如何,左旋的更利于细胞贴壁.我们一般使用0.01%浓度的,包被过夜,第二天用双蒸水洗两三次,超净台紫外照射,风干.可以直接买sigma的原装粉剂自己配.还有,配好的多聚赖氨酸在4度时间不能放置太久,大概就一两周吧.存放于-20度中的一般为0.1%的,而且不能反复冻融,只能融化一次.最好是配好后分装.
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