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标题:【求助】划痕试验（Wound scratch assay）

dodoit[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】划痕试验（Wound scratch assay）


请问：
做划痕试验时，是否需要先用FN包被六孔板？我看文献报道意见不一致。
如果需要，能起什么作用？
谢谢！
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milkdog[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
FN ??
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jude[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问楼主有没有划痕试验的操作方法啊？如有能不能发给我啊？
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newway[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室的划痕实验方法：
1 铺FN（10ug/ml）于96孔板，4℃过夜
2 PBS洗2遍，种细胞（1.1万/孔、2.5万/孔）
3 24h后200ul枪头划痕，无血清培养液冲洗（100-200ul/次），加入无血清或1%血清培养液100ul，加药
4 照相，测距离
5 6、12、24h后重复照相，测距离
希望有所帮助！
FN是促进细胞黏附和迁移的！
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luoliqiong[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
划痕实验的目的是什么啊？？
不太了解啊？？
为什么要做这个实验呢？
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发表于 2015-6-10 10:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

相关疾病：
用于测定肿瘤细胞迁移能力的体外试验方法之一。
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dodoit[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那是否不用FN也可以完成该试验呢？
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JK.jon[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我没有见过不用Fn的文献，并且我们这里好多人做这种实验都用Fn。
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feiya[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室的划痕实验方法不包被FN：
在铺板的时候,在板的背面用记号笔划5-6道平行的横线.
1六孔板指数生长期的细胞,此刻应该覆盖90%,利用刮子划痕,与以上的横线要垂直,一定要直,可以用长的滴管或其他无菌的东西比直,不要抖动.
2 此时你可能会加刺激,并连同培养液一起换掉,因为划起的细胞会贴付影响测距,此刻测量一个距离.在划痕与横线垂直的位置测量,而且每个时间点都在相应的位置测,这样可比性好,重复性强.
6,8,12,24h各时间点测距,最好不要超过细胞一个周期的时间观察,因为可能没有迁移而由于细胞增殖的出现假阳性结果.
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veiwu[使用道具]
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发表于 2015-6-10 10:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

版主能不能把实验步骤写的详细点。我要做这个实验，有些地方不明白。在划痕的地方重新长出来的细胞是迁移，还是细胞的增值那 ？？有什么区别啊 。谢谢提供帮助
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